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酶快速反应动力学 Kinetics of Fast Enzyme Reaction 第一章 绪论 Introduction to Enzyme Kinetics 酶反应的稳态动力学和瞬变动力学 酶反应动力学是解释酶反应机制具有代表性的方法。酶动力学包括 两个方面，即酶的稳态动力学（Steady-state kinetics）和预稳态动力学 （Pre-steady state kinetics），后者也叫瞬变动力学（Transient kinetics）。 酶的稳态动力学的基本目标是对酶催化的总反应进行测量与分析， 只涉及底物与产物，而不考察酶分子本身。 预稳态动力学可以直接研究总反应中所包含的分步反应。研究者的 兴趣所在是酶分子本身所发生的变化或能够反映这种变化的变化上。 两种动力学方法各有其优缺点。稳态动力学由于所要求酶制剂用量 少，且不需要使用特殊的仪器设备，因而长久以来获得了广泛的应用。 这种方法的缺点在于研究人员所获得的信息是间接的，有时也是不确切 的。预稳态动力学由于测量快速反应，而需要特殊的仪器设备（例如， 停流装置）。它的优点是可以提供用来解释复杂反应机制的信息。应该 指出，两种方法是相辅相成的，对于研究酶反应来说都很重要。 从二十世纪60年代起，测量快速反应的技术发展很快，性能越来越好的 测量快速反应的装置（如，停流分光光度计等）被不断推出，这给研究 酶反应的瞬变动力学提供了很大的方便。 第一节 研究酶反应的历史 一. Henri 的工作 Henri 在1902年发表了一篇论文。他首次引入了一个十分重要的概 念，既酶与底物符合物的概念，并把它用到速度方程的推导中。随后， 他讨论和阐述了重要的酶反应的动力学特征，涉及到三种酶反应： 1. 蔗糖转化酶(Invertase) 催化蔗糖的转化； 2. 淀粉酶(Amylase)催化糊精的水解； 3. 苦杏仁酶(Emulsin)催化水杨苷的水解。 对实验结果归纳成如下几个要点： 1. 当底物浓度低时，酶催化的水解速度随底物浓度的增加而增加； 当底物浓度高时， 水解速度保持恒定。 2. 反应速度与酶浓度成正比； 3. 产物的加入引起反应速度的减少，在低底物浓度时，减少尤明 显。 上述实验结果可以用下面两种反应机制解释, 机制 I: (1.1.1) (1.1.2) 机制 II: (1.1.3) (1.1.4) 如果考虑产物与酶结合生成EP，那么要把下述平衡包括到上述每 一个机制中去， (1.1.5) 在上述两种机制中，ES符合物的形成是共同的， 然而所起的作用