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植物(Plant)Bt-Cry1Ac蛋白(Bt-Cry1Ac protein)ELISA试剂盒说明书
即可检测。
4. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存
于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 自备物品
植物 (Plant)Bt-Cry1Ac蛋白 (Bt-Cry1Ac protein) 1. 酶标仪 (450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
ELISA检测试剂盒
3. 37℃恒温箱
使用说明书
操作注意事项
检测原理
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 (ELISA)。往
浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解
预先包被Bt-Cry1Ac蛋白 (Bt-Cry1Ac protein)抗体的包被微孔中,
后再使用。
依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封 (低温干燥)保
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的
存。
作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Bt-Cry1Ac蛋白
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明
(Bt-Cry1Ac protein)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸
书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
光度 (OD 值),计算样品浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
1. 样本不能含叠氮钠 (NaN3),因为叠氮钠 (NaN3)是辣根过氧化
物酶 (HRP)的抑制剂。
2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3. 植物萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清
试剂盒组成 2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μ
名称 96孔配置 48孔配置 备注 L;
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无 3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不
样本稀释液 6mL 3mL 无 加。
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL
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