2017年高考生物大冲刺 备考“最后30天”专题七 基因工程（含PCR技术）试题.docVIP

专题七 基因工程（含PCR技术） 基因工程又称为DNA重组技术，回答相关问题：0min） （1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即__________和从___________中分离。 （2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是___________。 （3）在基因表达载体中，启动子是______聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是__________。 （4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有______和______颗粒。 【解析】（1）获取目的基因主要有两大途径，即人工合成和从自然界已有的物种中分离。 （2）植物的成熟叶片中基因选择性表达，因此由所有RNA逆转录形成的cDNA文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因。 （3）在基因表达载体中，启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位。采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，由于易于培养，最常选用大肠杆菌（或细菌）。 （4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉 和钨粉颗粒。 【答案】（1）人工合成 生物材料（每空2分，共4分，其他合理答案可酌情给分） （2）cDNA文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因（5分，其他合理答案可酌情给分）（3）RNA（2分） 大肠杆菌（或答细菌）（2分）（4）金粉 钨粉（每空1分，共2分） PCR是一种DNA体外扩增技术 1988年，PCR仪问世，并被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定如图是PCR技术示意图，请回答下列问题：6min） 标准的PCR过程一般分为　 　、　 　、　 　三大步骤 ②引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段　 　 ③将双链DNA　 ______________ ，使之变性，从而导致　 　 ④引物延伸需提供　 　作为原料 【解析】标准的PCR过程一般分为高温变性、低温复性、中温延伸三大步骤． 引物是一小段单链DNA或RNA ③高温变性时，需要将双链DNA加热到95，使之变性，从而导致双链DNA分离成两条单链 ④中温延伸是需要以四种脱氧核苷酸为原料 【答案】变性 复性 延伸 单链DNA或RNA 加热到95 双链DNA分离成两条单链 四种脱氧核苷酸 1．基因工程的主干知识 目的基因的获取 基因表达载体的构建(目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因)。 将目的基因导入受体细胞 导入植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法； 导入动物：显微注射技术； 导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca2＋处理)。 目的基因的检测与鉴定 插入检测：DNA分子杂交； 转录检测：DNA—RNA分子杂交； 翻译检测：抗原—抗体杂交； 个体水平检测：抗性接种实验。 2．基因表达载体的构建过程 ．PCR的过程 选择题（min） 1．α1﹣抗胰蛋白酶是肝脏产生的一种糖蛋白，缺乏会引起肺气肿某公司成功研制出转基因羊，进入泌乳期后，其乳汁中含有人类的α1﹣抗胰蛋白酶，用于治疗肺气肿问答下列问题： （1）为获取目的基因，需要在肝细胞中提取　　，通过反转录产生cDNA，再通过　 　技术进行快速扩增 （2）将α1﹣抗胰蛋白酶基因与乳腺蛋白基因的　　等调控组件重组在一起，构建基因表达载体，然后通过　　技术，导入羊的受精卵中 （3）受精卵通过早期胚胎培养，一般发育到　 　阶段，通过胚胎移植到受体子宫孕育为选育出能泌乳的雌羊，移植前须从胚胎的　　部位取样，做DNA分析鉴定性别 （4）α1﹣抗胰蛋白酶是一种结构较复杂的糖蛋白，因此用上述方法生产，相对传统的转基因大肠杆菌生产，优势在于　　 【解析】（1）α1﹣抗胰蛋白酶基因在肝细胞中表达，所以可以在肝细胞中提取mRNA，反转录产生相应cDNA，再通过PCR扩增 （2）为了使α1﹣抗胰蛋白酶基因在乳腺细胞中表达，需要将其与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组，构建基因表达载体，然后通过显微注射技术，导入受精卵中 （3）牛和羊的胚胎一般发育到桑椹胚或囊胚，再进行胚胎移植；DNA分析鉴定性别须从胚胎的滋养层部位取样，这样既保证了遗传信息一致，又不影响内细胞团进一步发育 （4）糖蛋白的形成需要进行蛋白质的加工，相对原核细胞而言，羊细胞有内质网和高尔基体，具备蛋白质加工的能力 【答案】（1）mRNA PCR （2）启动子（或启动子、终止子） 显微注射 （3）桑椹胚