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脊髓灰质炎病毒三类检测方法的灵敏度 比较 龚成罗明张铁钢 【摘要】 目的对三种脊髓灰质炎病毒检测方法的灵敏度进行比较。方法将I、Ⅱ和Ⅲ型脊 灰病毒标准株(TR株)，从l×101倍系列稀释至l×lO7倍。选用三类方法对制备的脊灰病毒稀释液 系列进行检测，比较不同检测方法的灵敏度，三类方法分别为：RD和120B细胞分离脊灰病毒、肠道 病毒通用引物EVl／EV2和脊灰病毒特异性引物ucll／uGl分别进行RT-PcR检测脊灰病毒核酸、三 time 种商业性肠道病毒Real RT-PcR检测试剂盒检测脊灰病毒核酸。结果RD和L20B细胞分离脊 灰病毒的检测限可达脊灰病毒标准株的104倍稀释度；基于肠道病毒通用引物(EVl／EV2)和脊灰病 毒通用引物(ucll／uGl)的两种普通RT—PcR检测限分别为lO’、102倍稀释度；达安、金豪、基因格 三种商业性实时荧光RT-PcR试剂盒的检测限分别为：101、103、104倍稀释度。结论RD和L20B两 种细胞分离脊灰病毒的灵敏度并不亚于现有的核酸检测方法。目前部分商业性的肠道病毒通用型核 酸检测试剂盒主要针对手足口设计，对脊灰病毒的检测灵敏度反而不够，应慎重选用。 d眦RT-PcR 【关键词】 脊髓灰质炎病毒；病毒分离；RT-PCR；Real forP加oVin嵋 S伽商6VityC伽叩盯is蛐0fseVer砒nete|cti∞A始町s ∞Ⅳc陇昭，L∞胁ng，z抛．Ⅳc‰僻加斑眦加，埘M妇溉，踯粥蝴ler加掘e蛳p舢眦溉 ∞d∞柚试，＆咖酱100013，C晒氓 co他即，I西岵口lll栅：三∞胁昭，，啪州删∞@163．姗 obj删v咖Tb fh det∞ti∞． 【Abs删】 oompa聆the靶啮i6v畸of∞veral聃sayspolio“ms deluted如m l×101矗埘to M硼lo凼1Ⅱ优洲呲yp鹤ofpolio、rimBgkmd肿ds(I。Ⅱ蛳dⅢ)we他鲫叵auy 7 i舳la． l×10 tllr∞kindsof vims fold瑚pec6vely．卟啪dilIni∞9甜∞w帆tes刚bym柚0d8，i眦luding RD明dL20B cell8，RT-PCRassay8 6蚰勰say岫ilIg usiIlgenteIu“ms伊伽p3peci6cprimer眈b(EVl／ rel6me tIIr∞ Ev2)蛐dpolio“ms伊咖pspecific州merse协(UCll／UGl)，柚dRT-PCR嘲aysincluding re丑l 甜ailablec咖眦mialti眦RT．PcRki协．确舢岫．11ledet∞6佣li-IlitoftlIe“msi鲫lati傩咖蟑hodi8l x104fold．，n他眈璐itiviti储ofEVl／EV2b鼍I跹daIIdUCll／UGlbasedRT．PCR8we他I×103foldandl× 102 6呲PcR ki协(Da fold嗽pec6vely．’n把detec6伽li血oftII脱瑚lAn，K吨H删k帅dGen咄)懈 x x 1 x103foldandl 10．fold．C蚰d商岫 0f“硼i鲫】曩d伽met．10disnotl嘲 lO‘foJd，l tIe湖8ivi“ty 山蛐th砒of ac