第六篇 色谱导论.pptVIP

假设色谱柱由5块塔板组成，即N=5；组分的质量为1024个单位，分配系数k=1。当把组分加在零号塔板上时，组分瞬时在零号塔板上达到平衡，流动相和固定相组分量各为512。然后一个塔板体积的流动相以脉冲方式进入零号塔板上，将原来零号塔板上的流动相顶托到第一号塔板上，此时零号塔板与一号塔板上组分总量各为512；但1号塔板上流动相和固定相中组分量却各为256。此后，这一过程就重复进行，组分的分配情况，见下表。 塔板模型 例如 组分为1024单位，塔板数N=5，分配系数k＝1的分配表 32 43 15 2 1/4 1/32 16 45 63 23 5 1/2 1/16 15 61 90 36 10 1 1/8 14 84 124 55 16 3 1/4 13 104 165 83 28 6 1/2 12 126 210 120 45 10 1 11 (140 252 168 72 18 2 10 140 (280) 224 112 32 4 9 120 280) (280 168 56 8 8 80 240 (320) 240 96 16 7 32 160 320) (320 160 32 6 64 256 (384) 256 64 5 128 384) (384 128 4 256 (512) 256 3 512) 512 2 1024 1 柱出口 N4 N3 N2 N1 N0 加入体积 从上表可见，组分随着流动相在柱内移动时，一方面在柱内扩散，另一方面谱带的峰值逐渐向后推移(峰值位置用括号标出)。柱出口流出液的浓度分布呈低、高、低的变化。见以此值作得图与典型色谱图已很相似。但图9-7流出曲线是不对称的，与正态分布不同。这是由于柱子总塔板数太少的缘故。当N大于50时，就可得到对称的曲线。而一般色谱法中，N值是很大的，如气相色谱一般为103～106。若柱内的塔板数增加则峰形变窄并趋于对称。 塔板模型 当塔板数N很大时，流出液中浓度C随淋洗体积V的变化可用正态方程来描述，这就是色谱过程的流出方程。 C(V)= M/[√(2π)?σ]e-1/2*[(VR-V)/ σ]2，M为进样量，VR为保留体积，σ为标准差，σ＝VR/√N。当流出浓度最大时，V=VR，C(VR)-Cmax＝(√N *M)/(√2π*VR)－M/(√2π*σ)。 说明色谱峰的高度正比于进样量与色谱柱理论板数的方根，而反比于保留体积（或保留时间）与峰宽。 即：（1）色谱定量分析时，对于一定的色谱柱与保留体积（即相同的色谱条件）可用峰高或峰面积作为定量的依据；（2）当保留体积和进样量一定时，色谱柱的柱效越高（理论板数越高）则峰越高（峰宽越小）；（3）对一定的色谱拄随着组分出峰时间的推迟，保留体积增加，峰变矮，即先出的峰高而窄，后出的峰低而宽。 二、 塔板理论方程式 1、提出了组分在色谱柱内分布(或色谱峰)的数学模型。随着洗脱时间的增加，组分在柱内逐步形成向后迁移的浓度正态分布的谱带；正态分布的标准差决定于谱带在色谱柱内所在位置(L)、柱效(N=L/H)、淋洗时间。 三、塔板理论的意义 理论塔板数是反映柱效能的指标，塔板数是组分所达到平衡次数的多少。 组分1、组分2在色谱系统中分离的基本条件是容量因子k’不同，这仅是分离的可能性，能否分离还取决于组分在系统中达到分配平衡的次数。 对于柱效高的色谱柱，组分在柱内流过较短的距离(板高H)就能达到分配的再平衡；组分在柱内分配平衡次数越多，组分间性质差异表现的就越充分，组分与固定相的相互作用力也更显著，分离效果越好。 塔板理论的意义 2、说明了色谱柱的柱效 如流出曲线的形状、浓度最大值的位置、流出时间、色谱峰区域宽度与保留值的关系等。 3、能很好的解释色谱图 塔板理论的意义 塔板理论是一种半经验性的理论。组分在色谱柱内的移动状态并非理想状态。无法找出影响板高的内在因素，不能为色谱应用提供改善柱效的途径和方法。因为色谱过程不仅受热力学因素影响，还受分子扩散、传质等动力学因素影响。 4、塔板理论的不足之处 1956年，荷兰学者范第姆特(van Deemter)提出了色谱过程的动力学理论－速率理论。 影响板高的三种因素：涡流扩散A ，分子扩散B ，传质扩散(阻力)C 。这三种扩散可独立的造成组分谱带的展宽。 色谱柱的板高方程为：H = A + B/? + C? 式中：?流动相平均线速度，A为涡流扩散项系数，B为分子扩散项系数，C为传质阻力项系数。 四、速率理论 流动相带着组分分子流动时，由于固定相的颗粒大小不同，填充的松紧不同，造成各个流路的长度不同，形成紊乱的类似涡流的流动。也称多径项。流动相流经固定相颗粒之间较大空隙的流速大于流经颗粒之间较小空隙的