Chapter- 7 表面活性剂在溶液表.pptVIP

Chapter 7色谱技术Chromatography;本章主要知识点;凝胶色谱的分离原理及分类 离子交换及疏水作用层析的原理 高效液相色谱的分离原理及应用 蛋白质分离的常用色谱方法有哪些？;色谱技术（分配色谱）;色谱分离方法的分类;图示;色谱系统的基本组成;色谱分离的基本概念; ;阻滞因子Rf 阻滞因子是在色谱系统中溶质的移动速度和标准物（与固定相没有亲和力的流动相 Kd=0）的迁移率之比 体现某一种溶质与固定相之间的亲和力大小，As:固定相平均截面积，Am:流动相平均截面积;洗脱体积Ve 色谱柱中，使溶质从柱中流出所需流动相体积，为洗脱体积 不同的溶质，由于和固定相的亲和力的不同，洗脱体积也有所差异,Vm:色谱柱中流动相体积，Vs色谱柱中固相体积;色谱柱的理论塔板数、塔板高度 反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度与柱高之间的关系 理论塔板数的计算方法： N---理论塔板数 tR---保留时间 W1/2---半峰宽 Wb---峰底宽度 理论塔板高度：L---柱长 ;吸附色谱;Adsorption chromatography;常用的吸附剂： 氧化铝：有碱性氧化铝、中性氧化铝和酸性氧化铝。 ①碱性氧化铝，混有碳酸钠等成分而带有碱性，对于分离一些碱性成分，如生物碱类，但是不宜用于醛、酮、酯、内酯等类型的化合物分离，因为有时碱性氧化铝可与上述成分发生次级反应，如异构化、氧化、消除反应等。 ②中性氧化铝是由碱性氧化铝除去碱性杂质，冲洗至中性。仍属于碱性吸附剂的范畴，不适用于酸性成分的分离。 ③酸性氧化铝是氧化铝用稀硝酸或稀盐酸处理得到的产物，并使氧化铝颗粒表面带有 NO3-或 Cl-的阴离子，从而具有离子交换剂的性质，酸性氧化铝适合于酸性成分的柱色谱。 硅胶：酸性吸附剂，适用于中性或酸性成分的柱色谱。同时硅胶又是一种弱酸性阳离子交换剂，其表面上的硅醇基能释放弱酸性的氢离子，可因离子交换反应而吸附碱性化合物。硅胶作为吸附剂有较大的吸附容量，分离范围广，能用于极性和非极性化合物的分离， ;活性炭：是一种非极性吸附剂。柱色谱用的活性炭，最好选用颗粒活性炭，若为活性炭细粉，则需加入适量硅藻土作为助滤剂一并装柱，以免流速太慢。 活性炭是非极性吸附剂，其吸附作用与硅胶和氧化铝相反，对非极性物质具有较强的亲和能力，在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中较弱，因此水的洗脱能力最弱而有机溶剂较强。主要分离水溶性成分，如氨基酸、糖、苷等。 聚酰胺：为高分子聚合物质，不溶于水、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿及丙酮等常用有机溶剂，对碱较稳定，对酸稳定性较差，可溶于浓盐酸、冰醋酸及甲酸。 聚酰胺对有机物质的吸附属于氢键吸附，通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离氨基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。吸附的强弱则取决与各种化合物与之形成氢键缔合的能力。主要用于分离黄酮类、蒽醌类、酚类、有机酸类、鞣质类等成分。 ;展开剂的选择;常用展开剂的洗脱能力及极性比较;一般吸附色谱的操作程序;分配色谱;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;载体：通常为惰性材料，能吸附固定相液体 载体种类： 硅胶 硅藻土 纤维素 葡聚糖凝胶;固定相：通常选取各组分溶解度大的溶剂作为固定相 展开剂的选择:选择各组分溶解度相差大的溶剂 流动相可以是极性的（反相色谱法），也可以是非极性的（正相色谱） *反相色谱固定相是非极性的, 流动相是极性的;离子交换色谱;常用的离子交换树脂;Source 系列离子交换剂 特点：介质均匀、分辨率高、流速快、反压低 阳离子交换树脂 S系列 阴离子交换树脂 Q系列 MonoBeads 系列离子交换剂（Pharmacia） 特点：介质为亲水性聚醚，具有和Source系列相同的优点，但动态载量更大，寿命更长。 同样分为Q系列和P系列;Mini Q PC 3.2/3: Glutathione synthetase;Expanded Bed;(分子筛)凝胶色谱;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;分子筛凝胶色谱原理;Desalting proteins;凝胶色谱填料;纸层析;展开剂的选择;薄层色谱法;HPLC,高效液相色谱;HPLC 分离原理;反相液相色谱;载体：微粒多孔硅胶（粒径5μm~2