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总则实-验1微生物形态观察

环境生物学实验;如何进行环境生物学实验;实验安排与考核;课堂纪律;实验一 微生物形态观察 ;实验原理;1、菌种:培养12-16h的枯草杆菌(Bacillus subtilis),培养24小时的大肠杆菌(Escherichia coli) 2、染色液和试剂:草酸铵结晶紫染液、卢哥氏碘液、95%酒精、番红染液、二甲苯溶液、香柏油、无菌水 3、器材:废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。;实验内容;实验内容;实验内容;1;1、简单染色;(2)染色:将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上,加复红染色1-2min。 (3)水洗:用水洗去涂片上的染色液。 (4)干燥:将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。 (5)镜检:先低倍观察,再高倍观察,并找出适当的视野后,将高倍镜转出,在涂片上加香柏油一滴,将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。;crystal violet stain wash with water ; 革兰氏阴性杆菌;①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净: a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。 b.用擦镜纸沾少许二甲苯液将镜头擦2-3次。 c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次。注意擦镜头时向一个方向擦拭。将显微镜小心轻拿。 ②观察后的染色玻片用废纸将香柏油擦干净,放入回收容器内。;1、载玻片要洁净无油迹。涂片时,滴水不要过多,挑菌量宜少,涂片要均匀,菌膜宜薄。 2、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。;;显微镜的使用;实验原理;1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦,不能用手指或粗布,以保证光洁度 3.观察标本时,必须依次用低、中、高倍镜,最后用油镜。当目视接目镜时,特别在使用油镜时,切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面。 4.观察时,两眼睁开,养成两眼能够轮换观察的习惯,以免眼睛疲劳,并且能够在左眼观察时,右眼注视绘图。 5.拿显微镜时,一定要右手拿镜臂,左手托镜座,不可单手拿,更不可倾斜拿。 6.显微镜应存放在阴凉干燥处,以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片。

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