A型魏氏梭菌α毒素氨基端PLC结构分析与生物学活性鉴定.pdf

浙江农业学报 Aeto 201 7 ,2 9 (2 ) : 213 -2 1 9 http://w w w . 许 崇 利 ，许 崇 波 ，宫语晨 . A 型 魏 氏 梭 菌 a 毒 素 氨 基 端 P L 结 枸 分 析 与 生 物 学 活 性 鉴 定 [ J ] . 浙 江 农 业 学 报 ，2017,29 (2 ) ：213 -2 1 9 . DOI ：10. 3969/j. issn. 1004-1524. 2017. 02. 06 A 型魏氏梭菌a 毒素氨基端 P LC 结构分析与生物学活性鉴定 许崇利\许崇波2’％宫语晨3 ( 1 . 吉林化工学院生物与食品工程学院，吉林吉林 132022; 2 .韶关学院英东生命科学院，粵北生猪生产及疫病防控协同创新发展中 心，广东韶关 512005; 3 . 吉林农业大学动物科学技术学院，吉林长春 130118) 摘 要 : 利 用 P CR 扩增技术克隆 A 型魏氏梭菌 a 毒素氨基端的 PLC1-250 基 因 ，枸 建 含 PLC1-250 基因表达质 粒 的 BL21(DE3) (pN -PL Cl-250)重组菌株，序列分析和酶切鉴定证实枸建的 pN -PLCl-250 重组质粒含有目的 基因且基因序列与阅读框架均正确。 SDS分 析 表 明 ，PLC1-250蛋白表达量占菌体总蛋白相对含量的 18.76% 。利 用 SOPMA法 预 测 PLC1-250蛋 白 分 子 的 二 级 结 枸 ，且 同 源 模 建 了 其 3 D 结 枸 ，结 果 表 明 ，PLC1- 2 5 0 蛋白分子的二级结枸主要为 a 螺旋和无规则卷曲，三 级 结 枸 与 a 毒素相类似。此 外 ，还对其生物学活性 进行了鉴定，可 为进一步探索 a 毒素作用的分子机制，以及其分子结枸与生物学功能的关系奠定基础。 关 键 词 : A 型魏氏梭菌 ;a 毒 素 PL 基 因 ；生物学活性；圆二色光谱 中图分类号 :S852;Q78 文献标志码 :A 文 章编号 :1004-1524(2017)02-0213-07 Structural analysis and identification of biological activity of alpha-toxin amino-terminal PLC from Clostridium welchii type A XU Chongli1 , XU Chongbo2* , GONG Yuchen3 (1. College o f Biology and Food Engineering, Jilin Institute o f Chemical Technology, Jilin 132022, China ；2. North Guangdong Collaborative Innovation and Development Center for Swine Farming and Disease Control, Yingdong Col­ lege o f Life Sciences, Shaoguan University, Shaoguan 512005, China ；3. College o f Animal Science, Jilin Agricultur­ al University, Changchun 130118, China A bstract ：Amino-terminal PLC1-250 gene of Clostridium welch