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大豆分离蛋白提取方法总结作者：丽水天工环保1、酸沉碱提法。这是一种传统的分离提取方法。该法是利用大豆中大多数蛋白质在等电点(pH415) 时沉淀的特性,与其他成分分离,沉淀的蛋白质经调节pH 后溶解,因此称之为酸沉碱提法。酸沉碱提的缺陷是: 耗酸、耗碱量大,废水处理费用高,产品收率低。该分离提取方法有待改进。但目前仍然是工业化生产的基本方法。2、膜分离法。根据大豆蛋白的分子量大小、形状及膜与大豆蛋白的适应性,选择膜材料和不同截留分子量的膜,对大豆蛋白提取液超滤分离,超滤净化,使非截留组分排除,达到符合标准的分离大豆蛋白液,接着将净化后的大豆蛋白提取液超滤浓缩到所需的浓度后出料,喷雾干燥成粉状大豆分离蛋白。3、反胶束萃取分离法。反胶束是表面活性剂在有机溶剂中形成的一种聚集体,其中表面活性剂的非极性尾在外,与有机溶剂接触,极性头在内,形成极性核,该核具有包含水溶液和溶解蛋白质的能力,因而可以用此含有反胶束的有机溶剂从水相中萃取蛋白质。利用反胶束技术从全脂豆粉萃取大豆蛋白,可一次萃取50 %左右。大豆蛋白萃取过程非常快,用非扩散模型解释较为合理。该法需要的主要仪器有:自动水分测定仪、气浴恒温震荡器、离心机、凯氏定氮仪、分析天平、恒温磁力搅拌器和微量进样棒等。影响反胶束萃取过程的主要因素有表面活性剂的种类及浓度、水相的pH 值、离子强度、温度等。反胶束萃取技术的优点是:选择性高、操作方便、放大容易、萃取剂(反胶束) 相可循环利用、分离和浓缩同步进行。其缺点是:蛋白质在现有反胶束体系中稳定性不高,导致萃取前后蛋白质的活性损失较大,因而制约其工业化应用。4、反相高效液相色谱法这是对大豆蛋白中7 S 和11 S 球蛋白进行快速分离的一种方法。在分离条件为40 ℃、流速1mL/ min 的条件下,9 min 可完成相应球蛋白的分离。具体方法为: （1）试剂与试样。乙腈(CAN) (HPLC 级) 、三氟乙酸( TFA) (HPLC 级) 、HPLC 级水用于移动相的制备。Tris (三甲基氨基甲烷缓冲剂) 和2 —巯基乙醇(分析级) 用于分离大豆蛋白。大豆蛋白分离样本可为组织化蛋白、大豆粉、豆奶、强化婴儿大豆,使用前均测定其蛋白质含量。样品溶于水,然后于注样前用0122μm 经无菌处理的多酚滤纸过滤。全部样品和标样保存在3 ℃或冰冻条件下,样品溶液在分析当天现配,并保存在冰上备用。11 S 和7 S 大豆球蛋白在0130 % mol/ L Tris -HCl缓冲液和含有0101 mol/ L 22巯基乙醇条件下,经高速离心(10000 r/ min) 分别于各自的等电点(pH614 和pH 418) 析出。（2）高效液相色谱。Hewlett - Packard 1090 II型色谱仪,带有一个二极管倍增器和HP 9153C 型数据检测系统,每次进样20μL 。分离在PLRP - S柱(150 mm ×416mm I. D. ) 中进行,柱中填有多聚苯乙烯- 二乙烯苯颗粒( 300 ! , 8 μm) , 柱留时间(117 min) 通过不被吸附的尿嘧啶测定,蛋白质通过254 nm 紫外吸光值测定。缓慢流动相A 为011 %三氟乙酸( TFA) 水溶液;快速流动相B 为011 % TFA 乙腈溶液。移动相经0145μm 尼龙过滤器过滤,用少量氮气排气。该法的特点是不能用于区分7 S 和11 S 大豆蛋白,只适用于大豆蛋白产品的快速定性检测功能性大豆分离蛋白的组分分离提取加工技术\r\n\r\n一、成果简介\r\n\r\n　　本技术改变传统的大豆分离蛋白提取工艺，根据大豆蛋白质不同组分在一定介质环境和离子强度条件下溶解度的不同，在适合工业化生产的条件下将其按构成进行组分分离，得到富含7S组分和富含11S组分两种功能特性不同的大豆分离蛋白成品。并且可根据要求任意调整产品中7S/11S的比例。产品有很强的功能特性，可广泛地用于肉制品、乳制品、面制品、儿童食品以及保健品等领域中。\r\n\r\n　　本技术曾列入国家“十五”攻关计划项目“大豆深加工关键技术及设备研究与开发” （2001BA501A02）中，已于2003年12月23日通过了国家教育部组织的专家鉴定，达到国际先进水平。并且该成果已在科技部进行了成果登记，批准登记号为：008-360-03\r\n\r\n二、技术指标\r\n\r\n　　本项目开发的各专用型大豆分离蛋白产品的一般性指标均达到或略高于同类产品，其中富含7S组分及富含11S组分分离蛋白的氮溶解指数NSI均超过了90%，表现出良好的溶解性。\r\n\r\n　　另外，富含7S大豆分离蛋白的乳化性、溶解性、分散稳定性非常好。这一个特性非常适合于乳制品以及各种饮料中添加。这是目前分离蛋白市场中的一个空缺点，各研究机构和企