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南华大学生物化学第07章生物氧化

第六章 生物氧化 南华大学生化与分子生物学教研室 第7版生物化学多媒体课件 本章内容 概述 生物氧化(biological oxidation)的定义: 概 述 生物氧化的方式: 加氧 脱氢 失电子 概 述 生物氧化的特点: 在温和环境(体温,pH接近中性)中进行 在一系列酶的催化下逐步进行 能量逐步释放 生成的H2O是由脱下的H与O结合产生,CO2由有机酸脱羧产生 第一节 生成ATP的氧化体系 呼吸链 氧化磷酸化 影响氧化磷酸化的因素 ATP 通过线粒体内膜的物质转运 定义: 代谢物脱下的成对氢原子(2H)通过多种酶和辅酶所催化的连锁反应逐步传递,最终与氧结合生成水。由于此过程与细胞呼吸有关,所以将此传递链称为呼吸链(也叫电子传递链)。 一、呼吸链 呼吸链的组成    递氢体   递电子体 一、呼吸链 复合体   酶名称   多肽链数  辅基 复合体Ⅰ NADH-泛醌还原酶 39 FMN,Fe-S 复合体Ⅱ 琥珀酸-泛醌还原酶   4 FAD, Fe-S 复合体Ⅲ 泛醌-细胞色素C还原酶 10 铁卟啉, Fe-S 复合体Ⅳ 细胞色素C氧化酶  13 铁卟啉,Cu 一、呼吸链 复合体Ⅰ,NADH-泛醌还原酶 复合体Ⅰ的电子传递 NAD+ 和NADP+ 的结构式 NAD+(NADP+)与NADH或NADPH的互变 FMN与FMNH2的互变 铁硫蛋白 泛醌是移动的电子/质子载体 泛醌是脂溶性醌类化合物,有多个异戊二烯单位互相连接形成较长侧链。 能接受1个电子和1个质子还原成半醌型泛醌,再接受1个电子和1个质子还原成二氢泛醌,后者也可脱去2个电子和2个质子被氧化为泛醌。 复合体Ⅱ,琥珀酸-泛醌还原酶 功能:将电子从琥珀酸传递给泛醌 组成:黄素蛋白(以FAD为辅基)、铁硫蛋白和细胞色素(cytochorome,Cyt)b560 电子传递次序 细胞色素 复合体Ⅲ,泛醌-细胞色素C还原酶 功能 将电子从泛醌传递给细胞色素C 组成 细胞色素b(b562,b566)、细胞色素C1和铁硫蛋白 电子传递过程 复合体Ⅳ,细胞色素C氧化酶 功能:将电子从细胞色素C传递给氧 组成:包含13条多肽链,其中一条多肽链含有Cu-Cu,称之为CuA;另一条多肽链结合两个铁卟啉辅基,分别称之为Cyta和Cyta3(Cytaa3),此外还含有一个CuB。铜原子可进行Cu+ Cu2+ +e反应传递电子。 电子传递过程 呼吸链组分的排列顺序 由以下实验确定 根据呼吸链各组分的标准氧化还原电位,由低到高的顺序排列(电位低易失电子) 在体外将呼吸链拆开和重组,鉴定四种复合体的组成与排列 利用呼吸链特异的抑制剂阻断某一组分的电子传递,在阻断部位以前的组分处于还原状态,后面组分处于氧化状态,根据吸收光谱的改变进行检测。 利用呼吸链各组分特有的吸收光谱,以离体线粒体无氧时处于还原状态作为对照,缓慢给氧,观察各组分被氧化的顺序。 体内两条呼吸链 二、氧化磷酸化(oxidative phosphorylation) 定义:在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化,生成ATP,因此又称为偶联磷酸化。 氧化磷酸化偶联部位的确定方法 P/O比值 指物质氧化时,每消耗1摩尔氧原子所消耗无机磷的摩尔数(或ADP摩尔数),即生成ATP的摩尔数 线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值 自由能的变化 氧化磷酸化偶联机制 化学渗透学说 电子经呼吸链传递时,可将质子(H+)从线粒体内膜的基质侧泵到内膜胞浆侧,产生膜内外质子电化学梯度,储存能量。当质子顺浓度梯度回流时驱动ADP与Pi生成ATP。 三、影响氧化磷酸化的因素 抑制剂 呼吸链抑制剂:阻断呼吸链中某些部位电子传递 鱼藤酮(rotenone)、粉蝶霉素A、异戊巴比妥、抗霉素A (antimycin A )、二巯基丙醇、CO、CN-、N3- 及H2S等 解偶联剂:使氧化与磷酸化偶联过程脱离 二硝基苯酚 氧化磷酸化抑制剂:对电子传递及ADP磷酸化均有抑制作用 寡霉素 2,4-二硝基苯酚的解偶联作用 寡霉素——氧化磷酸化抑制剂 四、ATP 高能磷酸化合物 生物氧化过程中释放的能力大约有40%以化学能的形式储存于一些特殊的有机磷酸化合物中,形成磷酸酯(磷酸酐)。这些磷酸酯键水解时释放能量较多(大于21kJ/mol),一般称之为高能磷酸键,常用“~ P”符合表示。 含有高能磷酸键的

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