激活GABAB受体在针刺镇痛中的作用朱丽霞.doc

激活GABA 受体在针刺镇痛的作用 γ-氨基丁酸(GABA)是广泛分布于中枢神经系统的一种抑制性神经递质。在脊髓背角浅层胶状质内含有丰富的GABA能抑制性中间神经元,其末梢终止在初级传入末梢和深层投射神经元伸到浅层的树突形成的突触上,分别在突触前形成轴-轴突触和在突触后形成轴-树突触,在痛觉调制中起重要作用[1]。 以往的工作中观察到针刺对脊髓背角神经元伤害性反应的抑制效应,可被在电针前和电针同时微电泳导入GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculline,Bic)部分阻断[2,3],但在脑内注射Bic却不能明显阻断电针提高痛阈的镇痛效应[4],说明GABAA受体的激活参与针刺镇痛的脊髓节段性抑制。 GABAB受体主要分布在突触前末梢上,为了求证GABAB受体是否可能在突触前抑制中起更重要的作用。 朱丽霞等人采用Wistar大鼠,雌性,体重180～230 g,分别观察药物和电针的镇痛效应,每组6～8例，分别进行脑室插管和脊髓蛛网膜下腔插管。用辐射热照射尾部,测定甩尾潜伏期作为痛阈指标。观察脑室注射(icv)5μL或蛛网膜下腔(ith)注射10μL GABAB受体的拮抗剂CGP 55845对针刺镇痛效应的影响。 本实验采用了高效、选择性强的GABAB受体拮抗剂CGP 55845,给予足以阻断脑室注射GABA和Baclofen引起的镇痛效应所需的剂量(5 ng或50 ng),就能明显阻断电针引起的镇痛效应,蛛网膜下腔注射CGP 55845(50 ng或500 ng)也能部分阻断针刺镇痛效应。首次证明脊髓上和脊髓水平的GABA都可通过激活GABAB受体参与针刺镇痛效应。结合朱以往的实验结果,脑室注射Bic,剂量达到足以阻断外源GABA(20μg)的镇痛效应,仍不能阻断针刺镇痛效应,说明脑内GABA主要通过激活GABAB受体参与镇痛。微电泳导入Bic可明显阻断电针对脊髓伤害性反应的抑制效应,说明GABAA受体部分参与针刺镇痛中的脊髓节段性抑制。 实验证明了脊髓水平的GABA还可通过激活GABAB受体参与镇痛作用，GABAB受体激活主要通过突触前抑制P物质的释放,产生镇痛效应[11]。 近三年关于GABAB受体的研究有了突飞猛进的发展[19～21],先后报道了GABAB受体的两个亚型的分子结构,即GABAB1受体和GABAB2受体,GABAB1受体又分GABAB1a受体和GABAB1b受体。 并首先报道了GABAB受体 异源二聚体才是其功能状态。GABAB1a受体和 GABAB1b受体都可与GABAB2受体形成异源二 聚体,在脑内分布与功能各异。GABAB1a和 GABAB2形成异源二聚体主要分布在突触后, 而GABAB1b和GABAB2形成异源二聚体则主要 在突触前或突触外区。GABA与GABAB1受体 结合,通过和G蛋白耦合,在突触前抑制钙电 流,减少伤害传入释放神经递质,产生镇痛作 用。在突触后激活钾通道产生超极化抑制 效应 结果:icv GABA(125μg、250μg、500μg)或GABAB受体激动剂苯氯丁氨酸(Baclofen,25 ng、250 ng、2500 ng)可产生剂量依赖的镇痛效应。icv CGP 55845(5 ng、50 ng)可大部分阻断GABA和Baclofen的镇痛效应。针刺双侧“次髎”穴(50 Hz,1～2 mA)10 min,痛阈提高到针前值的(142.5±2.1)%,镇痛效应显著。针前icv CGP55845针后痛阈分别提高到(111.2±1.2)%和(112.1±1.1)%,阻断率分别为73.7%和71.6%,和事先icv生理盐水(143.7±2.0)%相比,阻断效应明显。若针刺前ith CGP 55845(50 ng、500 ng),也能明显阻断针刺镇痛效应。 说明外源GABAB受体的激动剂baclofen可通过激活GABAB受体产生镇痛效应[12,13]本实验观察到脑内或脊髓水平的GABAB受体被CGP 55845阻断后,针刺镇痛效应明显减弱或阻断,证明针刺穴位可促使GABA释放,激活脑内和脊髓水平的GABAB受体参与镇痛,可能也与突触前抑制P物质释放有关,在针刺镇痛效应中,可能还和针刺促使内源性阿片肽的释放,通过下行性抑制途径激活GABAB受体的参与有关。GABAB受体参与痛觉调制和针刺镇痛的可能分子机制在脑内GABA可通过GABAB受体突触前抑制抑制谷氨酸释放,减少兴奋性氨基酸在介导伤害性信息的传递中的作用而参与痛觉调制。在脊髓水平GABAA和GABAB受体的激活分别介导针刺激活不同阿片受体的下行性抑制,GABAB受体的激活在突触前抑制谷氨酸和P物质释放而产生针刺镇痛效应。