基因枪法介导大白菜小孢子转基因技术研究初报-园艺学报.PDF

园艺学报，2017 ，44 (1) ：62 –68. Acta Horticulturae Sinica 62 doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0730；http ：//www. ahs. ac. cn 基因枪法介导大白菜小孢子转基因技术研究初 报 1,2 1 1 1 1 1 1,* 李 菲 ，张淑江 ，章时蕃 ，武 剑 ，王晓武 ，张 慧 ，孙日飞 ， 张振贤2 1 2 （中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081 ； 中国农业大学农学与生物技术学院，北京 100193 ） 摘 要：围绕基因枪微粒的制备、大白菜小孢子对基因枪轰击的耐受能力以及小孢子的胚胎发生能 力开展研究，初步建立了以小孢子为外植体的遗传转化体系。高胚胎发生的大白菜材料‘CC-4 ’的小孢 6 子在基因枪 7.58 × 10 Pa 爆破压力，9 cm 的轰击距离下，利用直径 0.6 μm ，亚精胺包裹的金粒子微弹以 每次 500 μg 的金粒子量连续轰击 5 次，小孢子活力不受影响，培养 1 d 后 GUS 基因瞬时表达检测，平均 每皿可获得 20 个以上转化小孢子；小孢子培养 15 d 后成功获得胚状体，GUS 基因瞬时表达检测，平均 每皿最多获得 4 个遗传转化的胚状体，40 个花蕾可获得 20 个以上转化胚状体。初步探讨基因枪法介导大 白菜小孢子结果表明：大白菜小孢子数量庞大易收集，可耐受基因枪的多次轰击，并能继续保持胚胎发 生的能力，作为新尝试的遗传转化受体，有可能是解决白菜类作物再生困难，提高转基因效率的有效手 段。 关键词：大白菜；小孢子；基因枪；转基因 中图分类号：S 643.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2017 ）01-0062-07 Transformation of Chinese Cabbage Microspores by Particle Bombardment 1,2 1 1 1 1 1 1,* LI Fei ，ZHANG Shujiang ，ZHANG Shifan ，WU Jian ，WANG Xiaowu ，ZHANG Hui ，SUN Rifei ， 2 and ZHANG Zhenxian 1 2 （Institute of Vegetables and Flowers ，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100081，China； College of Agriculture and Biotechnology ，China Agricultural University，Beijing 100193，China ） Abstract ：Chinese cabbage transient GUS ge