血管内皮生长因子抑制剂生物学活性检测方法的建立.pdfVIP

中国生物制品学杂志2009 年9 月第22 卷第9 期 Chin J Biologicals September 2009 ，Vol. 22 No. 9 · · 895 中国图书分类号［R34］ 文献标识码 A 文章编号 1004-5503 （2009）09-0895-04 【治疗制品】 血管内皮生长因子抑制剂生物学活性检测方法的建立 王兰 饶春明 李永红 高凯 王军志 【摘要 】 目的 建立血管内皮生长因子抑制剂（VEGF Trap）生物学活性检测方法。方法 利用HEK293 ／ D9 ／ Flt-18R （al－ pha）／ Flt-IL18R （beta），clone V3H9 细胞系，通过荧光素酶检测系统（Steady-Glo誖Luciferase Assay system）进行VEGF Trap 的生 物学活性检测，用VEGF Trap 参考品计算供试品的相对百分效价，并对该方法进行精密性和准确性验证。结果 VEGF Trap 供 B 试品及参考品在该方法中均存在量效关系，且符合四参数方程式：y = （A - D）／ ［1 + （X／ C）］+ D。3 批VEGF Trap 原液和6 批 成品经3 次测定，相对百分效价的平均值在（90. 00 ± 2. 40）% ～ （116. 77 ± 16. 50）%之间，变异系数均小于15%。1 批VEGF Trap 原液及成品经3 次测定，回收率分别为（90. 40 ± 2. 67）%和（117. 20 ± 18. 12）%。结论 已成功建立VEGF Trap 生物学活性检测 方法，该方法重复性好，准确性高，可作为VEGF Trap 生物学活性的常规检测方法。 【关键词】 血管内皮生长因子抑制剂；生物学活性；荧光素酶检测系统 Development of A Method for Determination of Biological Activity of Vascular Endothelial Growth Factor Trap WANG Lan, RAO Chun-ming, LI Yong-hong, et al （National Institute for the Control of Pharmaceutical and Bio－ logical Products, Beijing 100050, China） 【Abstract 】 O bjective To develop a method for determination of biological activity of vascular endothelial growth factor （VEGF）Trap. Methods The biological activity of VEGF Trap was determined by Steady-Glo 誖 Luciferase Assay System using HEK293 ／ D9／ Flt-18R （alpha）／ Flt-IL18R （beta）, clone V3H9 cell line, and relative percent potency was calculated. The developed method was verified for precision and accuracy. Results Either test sample or reference of VEGF Trap showed a dose-response mode B