双重免疫组化技术确定子宫平滑肌肿瘤中肥大细胞的亚型.pdf

实用肿瘤杂志2007 年　第22 卷　第2 期 1·65 · 双重免疫组化技术确定子宫平滑肌 肿瘤中肥大细胞的亚型 朱雪琼, 向　梅, 林　毅, 吕杰强 (温州医学院附属第二医院, 浙江 温州 325027) 摘要: 目的　建立并优化用于检测子宫平滑肌肿瘤中肥大细胞的亚型的双重免疫组化染色方案。方法　采用 双重免疫组化染色同时在肥大细胞胞浆表达的类胰蛋白酶和类糜蛋白酶, 分别对该技术中两种抗原不同修复方法 的顺序、两种不同酶系的选择和顺序、两种色彩对比鲜明的显色底物的选择等步骤进行一系列的优化。结果　子宫 平滑肌肿瘤中肥大细胞大部分为既含有类胰蛋白酶又含有类糜蛋白酶的TC 型肥大细胞, 少部分为仅含有类胰蛋 白酶的 型肥大细胞。而未见到仅含类糜蛋白酶的 型的肥大细胞。结论　采用优化的双重免疫组化染色方案以 T C 确定子宫平滑肌肿瘤中肥大细胞的亚型是完全可行的。 关键词: 子宫肿瘤病理学; 平滑肌瘤病理学; 肥大细胞病理学; 免疫组织化学 ( ) 中图分类号: R 737. 33　　文献标识码:A 　　文章编号: 2007 　　人类的肥大细胞根据其胞浆颗粒内中性蛋白酶 购自美国 公司, N aph tho l A S M X Pho sphate Sigm a 组分的差异被区分为三种亚型, 即含类胰蛋白酶的 、 、水性封片剂等均购自福州迈新公 BC IP NBT A EC T 型肥大细胞, 同时含类胰蛋白酶和类糜蛋白酶的 司。 [ 1 ] TC 型肥大细胞, 含类糜蛋白酶的C 型肥大细胞 。 1. 2　病例　2002 年6 月～ 2005 年9 月之间温州医 不同亚型的肥大细胞具有不同的生物学作用。近年 学院附属第二医院的存档蜡块标本。子宫平滑肌肿 来, 肥大细胞各亚型与肿瘤的发生、发展以及预后的 瘤包括子宫普通型平滑肌瘤、富于细胞平滑肌瘤、奇 关系越来越受到学者们的重视[ 2, 3 ]。子宫平滑肌肿瘤 异型平滑肌瘤和子宫平滑肌肉瘤各 5 例, 均为我院 是妇科最常见的盆腔肿瘤。迄今为止, 国内、外均尚 手术切除标本, 所有的组织常规固定, 石蜡包埋, 均 未见关于子宫平滑肌肿瘤中肥大细胞亚型研究的报 经病理学确诊。 道。本研究采用优化的双重免疫组化染色方法同时 1. 3　双重免疫组化染色方法　取各种子宫平滑肌 ( ) 染色均在肥大细胞胞浆表达的类胰蛋白酶和类糜蛋 肿瘤组织4 m 石蜡切片 切片经多聚赖氨酸处理 白酶, 以确定子宫平滑肌肿瘤中肥大细胞的亚型, 为 60 ℃烘烤60 分钟; 二甲苯脱蜡10m in ×2 次, 常规水 (