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左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的实验研究
左旋咪唑诱导实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的实验研究
作者：李侃，李彬，何家富，龚权，张燕翔，张道明，郑晓娟，丁建中
【摘要】 目的观察左旋咪唑（LMS）对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的影响，并探讨LMS诱发炎性脱髓鞘白质脑病发病机制。方法采用流式细胞术检测EAE大鼠脊髓单个核细胞上CD4，CD28和CD152的表达水平。结果LMS同时给药组和预处理的EAE组大鼠脊髓内单个核细胞上CD4和CD28的表达水平，均明显高于非LMS处理的EAE模型组。结论LMS能促进EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD4和CD28的表达，提示LMS上调CD4和CD28的表达与可能LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病有关。
【关键词】 左旋咪唑 实验变态反应性脑脊髓炎
Abstract：ObjectiveTo observe the effect of levamisole (LMS) on expressions of CD4, CD28 and CD152 on mononuclear cells in spinal cords of rats with experimental allergic encephalomyelitis(EAE), and study the pathogenesis of inflammatory demyelinating leukoencephalopathy induced by LMS. MethodsUsing flow cytometry, we detected levels of CD4, CD28,CD152 in mononuclear cells in spinal cords of EAE rats.ResultsThe expression level of EAE rats treated with LMS showed higher than that of rats treated without LMS.ConclusionLMS could exacerbate EAE by enhancing the expressions of CD4 and CD28 in spinal cords of EAE rats, and up-regulation of expressions of CD4 and CD28 may play a crucial role in inflammatory demyelinating leukoencephalopathy induced by LMS .
Key words：Levamisole; Experimental allergic encephalomyelitis
左旋咪唑(Levamisole, LMS)为四咪唑的左旋异构体，是国家和WHO抗蠕虫病基本药物，作为广谱驱肠虫药使用于临床。1971年，Renoux发现LMS具有增强免疫的作用,其作为免疫增强剂被推广用于慢性感染、皮肤疾病、自身免疫性疾病及肿瘤等疾病的免疫调节辅助 治疗 ，长期以来被认为安全低毒。但近二十年来，国内外发现 LMS 能导致严重的中枢神经系统（CNS）功能障碍—左旋咪唑性白质脑病。LMS与LMS性白质脑病的因果关系，已被系统的药物流行病学研究所证实［1］，但其诱发该病的确切发病机制仍不清楚。实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis, EAE)为CD+4T细胞介导的对髓鞘抗原的自身免疫性疾病,是研究炎性脱髓鞘白质脑病的经典动物模型。本研究通过观察LMS对EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD4，CD28和CD152表达的影响，探讨 LMS 诱发的炎性脱髓鞘白质脑病发病机制。
1 材料
1.1 动物
雌性 SD 大鼠，5～8 周龄，体重 170～210 g。豚鼠(雌雄不拘)，质量 250～300 g， 由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。动物购回后先适应性饲养 1 周，饲养条件为室温18～28℃，相对湿度 40％～70％ ，每日12 h 光照维持，昼夜循环，自由饮水，分笼饲养。
1.2 药物与试剂
左旋咪唑购于 Sigma 公司。卡介苗（Bacille calmette guerin,BCG）、百日咳疫苗（Bordetella pertussis vaccine,BPV）购于卫生部上海生物制品研究所。淋巴细胞分离液购于美国Caltag Laboratories公司。胰蛋白酶溶液购于杭州吉诺生物医药技术有限公司。FITC标记的小鼠抗大鼠CD152抗体、
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