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荧光探针
朱
1
2
内容提要
• 探针的分类
• 探针的应用
• 探针的选择
3
动
物
细
胞
结
构
示
意
图 4
荧光探针的分类
按照荧光探针制作方式
化学荧光探针: 化学方法合成的
基因荧光探针: 可遗传、由DNA编码、蛋白质组成的
按照荧光探针功能来分
…….
5
基因荧光探针
荧光基因探针
绿色荧光蛋白
Green Fluorescence Protein
最 早 , 绿 色 荧 光 蛋 白 ( GFP ) 是 由
Shimomura 等人在研究水母发光蛋白
时 发 现 的 , 水 母 发 光 蛋 白 是从 水 母
Aequorea 中得到的一种有生物活性发
光蛋白质。
6
基因荧光探针
绿色荧光蛋白的生物化学特征
238个氨基酸组成。
吸收峰395nm
发射波长508nm
稳定性:65℃、pH11、
1%SDS、6mol/L盐酸
胍,或蛋白酶处理几小
时,仍然保持荧光活性。
7
基因荧光探针
绿色荧光蛋白的发光机制
成环反应
A
氧化
8
基因荧光探针
光异构化和光漂白
9
基因荧光探针
突变和光谱变化
根据荧光基团组成:
野生型、酚阴离子型(GFP-
S65T) 、中性酚型(Sapphire)、
YFP 、CFP、BFP、苯基型
颜色:
蓝色BFP、青蓝色CFP、绿色
GFP、黄色YFP
10
基因荧光探针
(引自Cubitt,A.B.,1999 )
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