药物分析复习总结课案.docx

第二章药品质量控制与药物分析方法验证SOP（标准操作规程）QC（质量控制）GLP（药物非临床研究质量管理规范）（Laboratory）GCP（药物临床试验质量管理规范）（Clinical）GMP（药物生产质量管理规范）（Manufacture）系统误差（具有固定的正或负偏差）(方法误差；试剂误差；仪器误差；操作误差)偶然误差（不可定误差）RSD即变异系数（相对标准偏差）容量分析相对误差（RE）通常在0.2%以下；仪器分析法RE通常为2%~5%称量的误差应小于1%药典中API未规定含量百分数上限时，即不超过101.0%消除系统误差方法：回收试验、校准仪器、对照实验、空白试验（回收试验：考察分析方法能够对样品中被测物给予全量相应的能力验+证试验95%的置信区间用1.96σ值进行计算方法学验证参数：专属性；准确度（回收率）；精密度（RSD）；定量限；检测限；定量限；线性与范围称量时要多称一位，比如要称2.0g，则应称取1.95g~2.05g，而不是1.5g~2.5g精密称量指称取重量应准确至所取质量的千分之一热水指70~80度的水不管鉴别、杂质测定（定量、限度）、含量测定，都需要进行的方法学验证为“专属性”和“耐用性”常用化学试剂质量等级：化学纯、分析纯、试剂纯、优质纯分析方法验证的主要效能指标：准确度；精密度（重复性，中间精密度，重现性）；专属性；耐用性；线性和范围；检测限和定量限；测量不确定度的含义：是表征合理地赋予被测量值的分散性，与测量结果相联系的参数。药典附录包括“制剂通则”“通用检测方法”“指导原则”杂志检查一般为限度检查第三章样品的前处理和药物提取技术一、生物样品的采集（血浆、血清、全血；尿液；组织样品）血浆：加抗凝剂后，2500~3000r/min离心5~10分钟血清：静止凝固后，2500~3000r/min离心5~10分钟二、生物样品的预处理（目的；影响因素；有机破坏，除蛋白质，结合物的水解，化学衍生化，游离药物分析的样品前处理方法）目的：使药物从结合物中释放；防止杂质干扰；满足专属性；防止仪器污染影响因素：药物理化性质；浓度范围；测定目的；生物样品类型；预处理和分析技术预处理技术：有机破坏湿法破坏：硝酸-高氯酸（对含氮杂环药物的破坏不够完全）干法破坏：马福炉灰化法；低温等离子灰化法；氧瓶燃烧法（常用于卤素）除蛋白质加入与水相混溶的有机溶剂脱水加入中性盐盐析加入强酸生成不溶性盐加入重金属盐类沉淀剂加热结合物水解：水解法；酶解法；溶剂解法化学衍生化游离药物分析的样品前处理方法（常用于血液处理中）平衡透析法；超滤法还有超离心法和凝胶过滤法等三、提取分离及相关技术（液-液提取法；离子对提取法；固相萃取法；固相微萃取技术，微透析，柱切换）液-液提取法：水相的pH很重要，决定药物的存在状态；碱性药物最佳pH要高于pKa值1~2个单位；而酸性则要低于pKa值1~2个单位离子对：提取离子性药物的方法；添加呈相反电荷的反离子物质固相萃取法：即色谱；吸附分配离子交换；柱活化（反相柱需数毫升甲醇打破表面疏水层），加样，柱清洗，柱干燥，样品洗脱，SPE自动化（色谱联用）固相微萃取技术：样品量小，适于分析挥发性与非挥发性物质微透析：插入体内，不破坏生物体内环境柱切换：六通阀。。四、化学衍生化（目的；光谱分析法，色谱分析法）目的：易于分离；提高灵敏度；增强稳定性；提高对光学异构体分离能力光谱：紫外衍生；荧光衍生色谱：分子中含有活泼氢者都可被化学衍生化（硅烷化，酰化，烷基化）（增大非极性）第四章药物鉴别试验一、物理常数测定法相对密度（与水的密度之比）熔点比旋度=旋光度/(厚度*浓度)吸收系数（E1%1cm：1%溶液液层厚度为1cm的吸光度值）其它还有黏度、馏程、折光率、解离常数等二、化学鉴别法（颜色变化；沉淀生成；气体生成；荧光反应；制备衍生物熔点鉴别法）芳香第一胺反应（重氮化-耦合反应）：加稀HCl溶解，滴加少量NaNO2，再加b-萘酚，生成橙黄色到猩红色沉淀有机氟化物：氧瓶燃烧法有机破坏成无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH=4.3的弱酸下生成蓝紫色配位化合物水杨酸盐：加FeCl3，显紫色；加稀盐酸，生成水杨酸沉淀（加乙酸铵成盐再次溶解）苯甲酸盐：加FeCl3，显赭色沉淀，加稀盐酸，变白色沉淀钠盐：焦锑酸钾反应，钠离子与焦锑酸钾作用生成难溶的沉淀（法二：焰色反应）钾盐：四苯硼钠反应，钠离子与四苯硼钠溶液反应生成白色沉淀（法二：焰色反应）铵盐：加过量NaOH加热，遇用水湿润的石蕊试纸，变蓝色（法二：气体使亚硝酸汞试液湿润的滤纸显黑色。法三：溶液加入碱性碘化汞钾产生红棕色沉淀）铁盐（亚铁）：滕氏蓝反应：滴加铁氰化钾，深蓝色沉淀，且沉淀在稀盐酸中不溶，在NaOH中变成红棕色氢氧化铁沉淀（法二：与邻二氮菲反应呈红棕色）铁盐（三价铁）：普鲁士蓝反