单克隆抗体技术和其应用.pptVIP

单克隆抗体技术及其应用 报告人：杨金先 单克隆抗体技术简介 1975年，Kohler和Milstein建立了淋巴细胞杂交瘤技术，两人由此杰出贡献而荣获1984年度诺贝尔生理学和医学奖。 单克隆抗体（monoclonal antibody）：针对预定抗原的同一抗原决定簇的，高度同质的，且能保证无限量供应的抗体。 单克隆抗体技术的理论依据：抗体的多样性、克隆选择学说、抗体基因的重排理论、抗体结构与生物合成机制。 单克隆抗体制备过程的注意事项 严格进行无菌操作，防止污染（细菌、霉菌、支原体、细胞） 根据实验的目标及时进行细胞的检测与筛选，（ELISA、IFA、凝集、中和，……） 对筛选得到的阳性细胞克隆进行早期单克隆（有限稀释法） 在单克隆细胞建株过程中不定期验证检测 防止单克隆细胞过度生长 ——老化 死亡 单克隆抗体与免疫血清的比较 单抗 单克隆抗体技术的应用 我们实验室已经制备的单克隆抗体 鱼类Ig单抗 欧洲鳗血清IgM 欧洲鳗粘膜Ig 石斑鱼IgM 大黄鱼IgM 鳜鱼IgM 鮰鱼IgM Fish Disease Research Center Fish Disease Research Center 骨髓瘤细胞 （SP2/O-Ag14 ）： 单克隆技术的原理 丧失合成次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（hypoxanthine guanosine phosph