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用于测定小分子多肽的两种电泳方法的比较
《生物工程进展》2001 ,Vol . 21 ,No . 3
用于测定小分子多肽的两种电泳方法的比较
张晓楠 曹云新 程司 张延凤
( 西安第四军医大学生化教研室 西安 710032)
摘要 对于小分子多肽的分析 目前多采用甘油 —SDS —PA GE 系统 ,但经实践后发现 ,此系统电泳
时间太长 ,导致小分子扩散丢失较多 ,小分子成像不清 。后经用尿素代替甘油 , 同时降低三层胶的
( ) ( ) ( )
浓度 ,制成 15. 5 %T C = 6 % 的分离胶 、10 %T C = 3 % 的间隙胶与 4 %T C = 3 % 的浓缩胶 ,结果
不但节省了电泳时间 ,且小分子多肽成像清楚 。
关键词 尿素SDSPA GE 小分子多肽 分子量
( )
电泳技术成为现代生物学不可缺少的手段 。近 胞色素 C 蚌埠康迈生物医药有限公司 ; 阳极缓冲
( ) (
半个世纪来 , 电泳技术在不断的改进 。但对于小分 液 02molL Tris p H89 , 阴极缓冲液 01molL Tris
子多肽的分析用现有的方法[ 1 ,2 ] 实验结果不太理想 , - 01molL Tricine - 01 %SDS p H825) ;凝胶缓冲液
( ) ( )
此系统电泳时间太长 5~6h ,且 2 . 5kD 左右的多肽 30molLTris - 03 %SDS p H85 ,浓缩胶与间隙胶
( )
显色太弱 ,成像不清 。经实践摸索 ,我们用尿素代替 的单体母液 凝胶浓度 495 % ,交联度 3 % ;分离胶
( )
甘油 ,且 降低三层胶的浓度 ,用同样的条件 , 电泳时 单体母液 凝胶浓度 495 % 、交联度 6 % ,2 ×样品
(
间减少一半 , 同时以单组分标准分子量作参照 ,其结 缓冲液 4 %SDS - 20 %甘油 - 01mmolL Tris p H68
β )
果证明了本方法的准确性与可行性 。 - 10 % - 巯基乙醇 - 0025 %溴酚兰
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