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项目联系人：刘立明教授地址：江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学食品科学与技术国家重点实验室四楼电话：0510真：0510-mail: mingll@jiangnan.edu.cn微生物发酵生产丙酮酸的关键技术产品概况??? 丙酮酸是一种重要的有机酸，广泛应用于制药、日化、农用化学品和食品等工业中，目前工业级丙酮酸国内价格为5万元/吨，全球丙酮酸市场需求共24000吨。丙酮酸的工业生产方法主要有酒石酸合成法和乳酸氧化法，工艺具有污染重、成本高等缺点，严重制约着着我国丙酮酸产业的可持续发展。微生物发酵法生产丙酮酸具有低成本、高质量等优势。技术性能指标??? 本研究室在自行选育的四重维生素营养缺陷型菌株光滑球拟酵母CCTCC M202019的基础上，从代谢能力、鲁棒特性和环境适应性等入手，阐释了影响T. glabrata高效积累丙酮酸的关键因素。实践了全局高效调控光滑球拟酵母代谢功能的新方法，在30 L发酵罐中：发酵时间60 h，丙酮酸浓度70.9 g/L，葡萄糖转化率为0.61 g/g，生产强度为1.18 g/(L?h)，Para-Pyruvate/Pyr 1.4 %。发酵法生产乙偶姻的关键技术产品概况??? 作为一种具有令人愉快的香味物质，乙偶姻广泛应用于食品、制药、化工等领域。微生物发酵法因具有生产效率高、原料来源广泛、生产成本低、环境污染较小，产品纯度可视为纯天然等优点，引起研究者的关注，具有广大的应用前景。技术性能指标? ??? 本研究利用高通量筛选策略，从土壤中筛选获得高产乙偶姻的菌株Bacillus amyloliquefaciensFMME044，在最优培养基条件下，乙偶姻产量为48.6 g/L。在分析该菌株生理特性的基础上，提出了有效地发酵过程优化策略，同时通过基于连续培养的适应性进化工程，获得一株耐受高浓度乙偶姻的突变菌株，发酵40 h乙偶姻产量达到70 g/L。微生物发酵生产阿卡波糖的关键技术产品概况??? 作为一种具有令人愉快的香味物质，乙偶姻广泛应用于食品、制药、化工等领域。微生物发酵法因具有生产效率高、原料来源广泛、生产成本低、环境污染较小，产品纯度可视为纯天然等优点，引起研究者的关注，具有广大的应用前景。??? 由于我国人口众多，并伴随城市化进程加快而导致的饮食结构改变和运动量减少等不健康生活方式，预计到2020年我国的糖尿病患者将会翻一番，对降糖类药物的需求量日益上升。阿卡波糖作为临床常用的α-葡萄糖苷酶抑制剂，在治疗糖尿病方面具有良好的药代动力学性质和低毒性，属于II型糖尿病的常用药物之一。阿卡波糖目前生产水平为6.6 g/L，市场价格为4000元/kg。技术性能指标??? 目前工业生产所用菌株合成阿卡波糖的基因簇已经基本清晰，可以借助构建基因组规模代谢网络模型解析阿卡波糖合成途径来达到提高其产量的目的。500 mL摇瓶指标为：发酵培养160 h，阿卡波糖浓度达到3.2 g/L，对细胞得率为0.26 g/g，生产强度为16.7 mg/(L?h)。微生物发酵生产异维生素C的关键技术产品概况??D-异抗坏血酸作为维生素C的光学异构体，具有抗氧化作用强、氧化速度慢等优点，广泛应用于食品、医药、化工等工业领域。2-酮基-D-葡萄糖酸(2-keto-D-gluconic acid，2-KGA)是D-异抗坏血酸的前体，作为一种重要的大宗发酵产品，2010年我国产量达到了40000吨左右，占世界年产量的一半以上。2-KGA工业化生产培养基采用的是蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等有机氮源，价格昂贵，成分复杂，且难以透彻灭菌，导致原料成本增加，扩大分离纯化难度而且容易引发噬菌体污染。技术性能指标??本研究筛选获得一株以(NH4)2SO4为唯一氮源的高产2-KGA 菌株，能有效地降低生产成本、分离纯化难度以及噬菌体污染的风险。主要技术指标：在30 L发酵罐发酵42 h，2-KGA产量达到241.6 g/L，葡萄糖得率0.93 g/g。微生物转化生产α-酮戊二酸的关键技术产品概况α-KG广泛应用于制药学、精细化工和动物饲料等工业领域。传统发酵过程中丙酮酸、富马酸、苹果酸等副产物过多，且发酵周期长。2012年我国L-谷氨酸产量为260万吨，价格约2万元/吨，是α-KG价格的1/12。因此根据谷氨酸与α-KG结构特点，寻找可以将谷氨酸中的氨基转变为酮基的重要酶制剂，从而将谷氨酸转化为α-KG，提高谷氨酸的附加值。技术性能指标结合文献调研和数据库检索，选择链霉菌生产的L-谷氨酸氧化酶 (LGOX)作为转化 L-谷氨酸生产α-KG 的酶制剂, 为了克服链霉菌属发酵生产LGOX周期长、酶活性低的缺点，将链霉菌LGOX的SSFG_06931基因与表达载体pET28a连接构建重组载体，转入E