细胞外热休克蛋白70对严重烫伤大鼠肠道免疫功能的影响.pdfVIP

.272 • 中华烧伤杂志2016 年5 月第 3H吉第 5 娘J Chin J Burns . May 2016 . Vol. 32 . No . 5 · 早期损害与脏器并发症· 细胞外热休克蛋白 70 对严重烫伤 大鼠肠道免疫功能的影响 邓鸿敖张红艳然林朋彭然 [ 摘要] 目的 了解严重烫伤大鼠肠道细胞外热休克蛋向 70( eHSP70) 与 IL-2 表达变化及两者 间的关系，另体外观察 eHSP70 对严重烫伤大鼠肠道派伊尔结 C03 T 淋巴细胞的彩响。 方法 ( 1)取 60 只雄性 50 大鼠，按随机数字表法分为正常对照组(仅麻醉) 10 只、烫伤组 50 只.烫伤组大鼠 背部造成30%TBSAID 度烫伤。 正常对照组于麻醉后即要1]. 烫伤组子伤后 3 、6 、 12 、24 、48 h ，各取 10 只 大鼠处死，取小肠组织，ELJSA 法检测 eHSP70 和l1L-2 的表达并进行相关分析。 ( 2) 另取 2 只雄性 SO 大鼠，同前致伤后 12 h ，分离小肠派伊尔结 C03T 淋巴细胞，用含体积分数 10% FBS 的 RPMI1640 培 养液培养，按随机数字表法分为空白对照组和5 、 10 、 20μg/mL eHSP70 组，每组 6 孔。 空白对ft~ 组不 行其他处理.后 3 组缩养液中分别加入相应质fi!: 浓度重组大鼠 eH5P70。 培养 48 h ，流式细胞仪检测 C03 T 淋巴细胞中 Thl 和 Th2 百分 比及细胞凋亡率， ELJSA 法检测细胞培养上清液中 IL-2 和 IL-IO 的表达。 细胞实验均重复 10 次。 对数据行单时紫方差分析、Kruskal-Wallis 秩和检验、SNK- q 检 验、Pea罔on 相关分析。 结果 ( 1)与正常对照组的( 1 278 :1: 135 ) 、 ( 48.6 :1: 4.9 ) ng/Illg 比较，烫伤组 大鼠伤后 3 、6 、 12 、 24 、 48 h 肠道 eHSP70 [ ( 728 :1: 93 )、 (412 :1: 3 1 ) 、( 3 1 4 士 21 )、( 528 土 40) 、( 1 028 土 97 ) ngimg] 和 IL-2 [ ( 38. 6 土 2. 川、(32 .3 :1: 1. 0 ) 、 ( 25.3 :1: 3. 6 ) 、 ( 33.9 :1: 4.1 ) 、 ( 44.3 :1: 2.6 ) ngilllg] 水 平均明显降低( q 值为 3.48 - 5.32 , P 值均小子 0.05 ) ， 均于伤后 12 h 这最低值。 1 1.-2 和 eH5P70 水 平呈明显正相关( r = O. 920 , P O. 01 ) 0 ( 2 ) 与空白对照组的( 8.6 :1:1. 1) % 、 ( 3.75 :1: 0.45 )% 比较， 5 、 10 、20μgilllL eHSP70 组 C03 T 淋巴细胞中 Thl 百分比明显增高 [( 1 1. 3 土 2.1) % 、( 15. 7 土 上 的%、( 10. 8 土 1. 5) % ， q 值为 2.97 句 4.57 ， P 值均小于 0.05 ] , Th2 百分比明也降低 [ (2. 39 主 0.38 )% 、( 1. 05 :1: O. 23 ) % 、 (2. 67 :tO. 26 ) % , q 值为 2.48-4.32 ， P 值均小子 0.05 ] 。 与空白对m! 组 的(34. 3 企 2.2 )% 、 (254 士 16 ) pg/Ill L 比较， 5 、 10 、20 附IIll L eHSP70 组 C03 T 淋巴细胞掷亡率明舅，陈 低[ (26.1 土 2.6)% 、 (20.7 士 1. 5) % 、 ( 3 1. 5 :1: 2 . 4 )% . q 值为 3.47-4.95 ， P 值均小子 0