盐酸小檗碱的提取0.0.docVIP

盐酸小檗碱的提取、精制及检识 小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。 黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch.），三角叶黄连（C.deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao）或云连（C.teetoides C.Y.Cheng）10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。 目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。 小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。Mp.145℃至160℃即分解。 小檗碱有三种互变异构体： 其中以季铵碱式结构状态最稳定，可以离子化呈强碱性，用过量的氢氧化钾处理小檗碱盐类时，可转变为醇式叔胺碱和醛式仲铵碱，季铵碱式小檗碱可离子化，故有一定亲水性，因此，游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。 小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表： 名称 水 乙醇 小檗碱 1：20 1:100 盐酸小檗碱(B.Cl) 1:500 几乎不溶 酸性硫酸小檗碱(B.HSO4) 1:100 微溶 中性硫酸小檗碱(B2.SO4) 1:30 可溶 中性磷酸小檗碱(B3.PO4) 1:15 可溶 小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。 一、实验目的 1. 掌握从黄连中提取、精制盐酸小檗碱的方法； 2. 学习小檗碱的化学性质与检识方法。 二、实验原理 利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度，制得盐酸小檗碱。 三、实验内容 （一）盐酸小檗碱的提取 称取黄连粗粉 100g，加 0.2%硫酸热浸三次，温度控制在 65℃~70℃，第一次加 0.5%硫酸 300ml时，热浸一小时，第二、三次分别加 0.2%硫酸 200ml，热浸半小时，趁热过滤，合并三次提取液，加入浓盐酸调至 pH 2~3，再加入提取液量 8%(W/V)的固体氯化钠，搅拌使之充分溶解；冷却即析出大量黄色沉淀，放置过夜，常压过滤，即得盐酸小檗碱粗品，于 80℃以下干燥，称重。 （二）盐酸小檗碱的精制 取盐酸小檗碱粗品加于20倍量的沸水中，加热数分钟，搅伴使其溶解。然后加入石灰乳调至 pH8～9，趁热过滤，滤液于 65℃左右加浓盐酸调至 pH2，放置冷却，即析出大量黄色沉淀，过滤，沉淀用蒸馏水洗至 pH2，抽干，于 80℃以下干燥，即得精制盐酸小檗碱，称重，计算产率。 （三）盐酸小檗碱的检识 1. 取自制精制盐酸小檗碱 50mg，加水 5ml，缓缓加热溶解后，加 5%氢氧化钠溶液 2滴显橙红色，放冷，加丙酮 4滴，即发生浑浊，放置后，生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱，然后取上清液，加丙酮 1滴，如仍发生浑浊，再加适量丙酮使沉淀完全；过滤，取滤液 2ml，加 10%稀硝酸 1ml，摇匀，再加 0.1m1/L硝酸银试液 2滴，即有白色沉淀产生。 2. 取自制精制盐酸小檗碱约 2mg，置白瓷蒸发皿中，加浓硫酸 lml溶解，加 5%没食子酸乙醇溶液 5滴，置水浴上加热，即显翠绿色。 3. 取自制精制盐酸小檗碱约 5mg，加水 1m1使溶解后，加锌粉少许，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔 10分钟加一次，观察其黄色是否消退。 5. 盐酸小檗碱的薄层层析（氧化铝薄层层析法） 吸附剂：中性氧化铝（Ⅱ级，过 160目筛），干法铺板（软板）。 样　品：①自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液 ②盐酸小檗碱标准品乙醇溶液 展开剂：①氯仿－乙醇(9:1) ②甲醇－丙酮－乙酸 (4:5:1) 显色剂：先置于紫外光灯(365nm)下检视，再喷雾改良碘化铋钾试剂，观察斑点颜色，并与标准品对照。 四、实验注意事项 1、用硫酸浸泡时，硫酸的浓度以0.2％为宜，此时生成的硫酸小檗碱在水中溶解度较大，若加入过量，小檗碱就形成酸式硫酸盐，水中溶解度就降低(1：100)