第22章 引起侵袭性感染的真菌.pptVIP

分离培养：将标本接种在沙氏培养基上，病原性隐 球菌在25℃和37℃孵育均可生长，而非病原性隐球菌在37℃时不生长。培养2~5d后观察菌落形态特点，并取菌落作印度墨汁负染色镜检。 其他检查方法 酚氧化酶试验、尿素酶试验、糖同化及发酵试验 新生隐球菌微生物鉴定 1.酚氧化酶试验 将菌接种L-多巴枸橼酸铁和咖啡酸 培养基中，培养2~5d，新生隐球菌呈棕黑色菌落。用已 知新生隐球菌和浅白隐球菌分别作阳性和阴性对照。 2.脲酶试验 新生隐球菌能产生脲酶，可分解尿素琼脂 培养基的尿素形成NH4和CO2，使培养基pH升高， 培养基由黄色变为粉红色。白假丝酵母菌则为阴性。 3.糖同化及发酵试验 新生隐球菌能同化葡萄糖、半 乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖类、不同化硝酸 盐。非致病性隐球菌则不能同化肌醇。 曲 霉 菌 曲霉菌是条件致病菌，人体对其有极强免疫 力，只有在人体免疫功能降低时才能致病。 曲霉可引起呼吸系统曲霉病；全身性曲霉 病；曲霉可产生毒素引起机体食物中毒；致 癌作用 。 最常见的是烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉 曲霉菌生物学特征 菌丝：有隔，多细胞性，有分枝；足细胞 （接触培养基的部分，厚壁而膨大） 分生孢子梗：从足细胞直立生长 顶囊：孢子梗顶端膨大，半球形或椭圆形 小梗：顶囊上，辐射状，一层或二层杆状 分生孢子：小梗顶端，成串，球形，不同颜色 分生孢子头：菊花样的头状结构 菌落：绒毛状或絮状，菌种不同颜色不同 曲霉结构图 烟曲霉菌落 烟曲霉形态（400×） 黄曲霉菌落 黄曲霉形态（400×） 黑曲霉菌落 黑曲霉形态（400×） 土曲霉菌落 土曲霉形态（400×） 构巢曲霉菌落 构巢曲霉形态（400×） 五种致病性曲霉的比较 菌名 菌落 顶囊 小梗 孢子 烟曲霉 绿色或 深绿色 烧瓶状 单层，顶囊上半部 球形，有小棘， 绿色，成链排列 黄曲霉 黄色 球形或近球形 双层，第一层长，布 满顶囊表面，放射状 球形或梨形，有 小棘，成链排列 黑曲霉 黑色 球形或近球形 双层，第一层长，布 满顶囊表面，放射状 球形，黑褐色，有 小棘，成链排列 土曲霉 淡褐色 或褐色 半球形 双层，第一层短， 顶囊的2/3, 放射状 球形，小，表面 平滑，成链排列 构巢曲霉 绿色或 暗绿色 半球形 双层，第一层略长， 顶囊的上半，放射状 　球形，绿色， 成链排列 曲霉微生物检验 直接显微镜检查：取痰液等被检材料涂于载玻片上，在镜下可见分枝的菌丝、较粗的分生孢子头，顶端膨大形成顶囊，顶囊上有小梗，小梗上有许多小分生孢子。 抗原检测（GM、G试验）、抗体检测 分离培养与鉴定：标本接种沙氏琼脂，室温培养后菌落形成快，呈毛状，一般为黄绿色。将菌落涂片镜检可见特征性的分子孢子头和足细胞。根据不同的曲霉的形态和菌落特征确定菌种。 组织胞浆菌属 有两个种：荚膜组织胞浆菌、组织孢浆菌的杜波变种。 本菌传染性极大，主要侵犯网状内皮系统，有时也可由血行播散而侵犯全身各脏器。 组织胞浆菌是一种双相型真菌，在25℃培养时呈典型菌丝体，在37℃培养时为酵母型，位于细胞内或外。 微生物检验 1.直接显微镜检查　应涂片染色后检查。 痰液等标本：涂片后先用甲醇固定10min，再用姬 姆萨染色镜检 。 皮损、脓液等标本：用20%KOH涂片后镜检 2.抗原检测、药物敏感试验、抗体检测 3.分离培养与鉴定 ①标本 含抗生素的沙氏培养基 25℃培 养，生长缓慢，有时需4~6周才开始生长，逐渐 形成白色至棕色绒毛状菌落 。 ② 转种于血琼脂培养基上，37℃培养，很快形成酵母型菌落。 ③培养物显微镜特征 ：25℃沙氏培养，可以发现特征性的大分生孢子，但初代培养不典型，继代培养可有典型大分生孢子。 ④鉴定：取可疑菌落涂片染色镜检，并作脲酶 试验和明胶液化试验。 荚膜组织胞浆菌菌落为棉絮状，镜检可见细长有隔菌丝，菌丝侧面或孢子柄上长有特殊的圆形大分生孢子，厚壁，四周有棘突，排列如齿轮直径8～14μm，表面有指状突起，形成对组织胞浆菌有突出诊断意义的特征性齿轮状大分生孢子。血液标本油镜下镜检可见在中性粒细胞或单核细胞中有卵圆形或圆形的酵母细胞。 卡氏肺孢菌 卡氏肺孢菌（pneumocycsis carinii,PC），曾称为卡氏肺孢子虫。 卡氏肺孢菌可寄生于多种动物，也可寄生于健康人体。广泛分布于自然界，如土壤和水等。卡氏肺孢菌病的传播途径主要