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13RNA生物合成
第十二章 RNA生物合成
RNA transcription
[概述]:DNA转录RNA前体 加工成熟RNA的过程
RNA合成的两种方式:
1、 DNA指导的 RNA合成。
2、 RNA指导的 RNA合成。
第一节 转录作用
一、转录作用及特点
由DNA指导的RNA合成, DNA以碱基互补原则,决
定合成RNA的全部碱基成分及排列顺序,将DNA模板
上的遗传信息传递到RNA分子的过程为转录作用。
1、反应体系: DNA模板,NTP,酶,Mg2+,Mn2+,合成
方向5’3’。连接方式-- 3’ , 5’磷酸二酯键。
2、转录特点:
不对称转录(asymmetric transcription)
DNA片段转录时,双链DNA中只有一条链作为转录
的模板,这种转录方式称作不对称转录。(图12-1
模板链及反意义链:(template strand)
指导RNA合成的DNA模板链。
编码链及有意义链:(coding strand)
不作为转录的另一条DNA链。 (图12-2)
由于基因分布于不同的DNA单链中,即某条DNA单
链对某个基因是模板链,而对另一个基因则是编
码链。
原料:四种磷酸核苷NTP,DNA中的A在RNA中变为U
合成过程是连续的,方向: 5’3’
合成部位:细胞核内
二、原核RNA聚合酶
[组成]:5个亚基,2’为全酶, 2’为核心酶。
[作用]: 识别DNA分子中转录的起始部位。
促进与模板链结合,并使DNA双链打开17bp.。
催化NTP的聚合,完成一条RNA链的聚合反应。
识别转录终止信号,停止聚合反应,参与转录
水平的调控。(图12-3)
[特点]: 聚合速率慢,30~85NTP/秒。
缺乏外切酶活性,无校对功能,错误率10-6。
不同的识别不同的启动子。例:32识别热休
克启动子。
可被药物抑制(利福平)。人的RNA聚合酶对利
福平不敏感。利用此特点可研制杀菌药物。
三、真核RNA聚合酶
真核较原核的酶复杂,已清楚的有Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ及Mt 4
型。(表12-1)
[组成]:均由多亚基构成,聚合酶Ⅱ中的某个亚基与原核聚合酶的亚基高度同源。
四、启动子及终止子(promoter,terminator,stop
signal)
(一)启动子
1、原核启动子:[结构]约55bp,分为起始点(start
site)、结合部位、识别部位。
[功能] 起始点:转录起始部位以+1表示,转录的
第1个核苷酸常为嘌呤---G,A。
结合部位:约6bp组成,是高度保守区,共有序列
为5’-TATAAT-3’ ,位于起始点上游-10。因Tm低,DNA
易解开双链,为RNA聚合酶提供场所。
识别部位:约6bp组成,在-35处,为高度保守区,序
列5’-TTGACA-3’, 因子识别此部位。(图12-4)
2、真核启动子结构(以RNA polⅡ为例)
于-25处含AT富集区, 共有序列TATAA(TATA box)
-70处含共有序列CAAT ,还含许多其它box ,例如 GC
box,E-box等。(图12-5)
含增强子[enhancer]和静息子[silencsr]
RNA polⅠ和 RNA polⅢ与聚合酶Ⅱ所识别的启动
子差异较大。
(二)终止信号:(图12-6)
特点:终止部位含GC富集区与AT富集区,它们分别
形成发卡结构和连续的U区,以终止转录。
蛋白因子辅助识别终止信号,参与终止。
五、转录过程 (以原核为例)
(一)起始
RNA聚合酶-σ识别起始位点 ↓
核心酶与DNA结合 ↓ E 以核心酶
DNA构象改变→局部双链打开17bp→NTP形成3’,5’二酯键 形式沿
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