2.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质公开课.pptVIP

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： 还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 脂肪+苏丹Ⅲ/苏丹Ⅳ→橘黄色/红色 蛋白质+双缩脲试剂→紫色 淀粉+碘→蓝 还原糖的鉴定： 还原糖包括： 还原糖的鉴定 检测原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 试剂：斐林试剂（甲液和乙液的混合液） 甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液 鉴定可溶性糖的实验材料 思考：为什么不用植物的叶或西瓜与西红柿的果实？ 蛋白质的鉴定 检测原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色 试剂：双缩脲试剂（A液和B液） A液0.1g/mL的NaOH溶液 B液：0.01 g/mL的 CuSO4溶液 斐林试剂与双缩脲试剂比较 脂肪的鉴定： 检测原理：脂肪+苏丹Ⅲ/脂肪+ 苏丹Ⅳ→橘黄色/红色 试剂：苏丹Ⅲ/苏丹Ⅳ 淀粉（多糖）的鉴定 实验原理：淀粉+碘→蓝色 实验步骤：取样2ml加入2滴碘液，观察颜色变化 实验结果：碘与淀粉变蓝，说明样品中有淀粉存在 课堂练习： 1.青苹果遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂反应，产生砖红色沉淀，这说明（ ） A.青苹果中含淀粉不含糖类 B.熟苹果中只含糖类不含淀粉 C.苹果转熟时淀粉水解为还原糖 D.苹果转熟时单聚糖合成淀粉 2.下列健康人的4种液体样本中，能与双缩脲试剂发生紫色反应的是（ ） ①尿液 ②胃液 ③汗液 ④唾液 A.①③ B.①④ C.②③ D.②④ 3.在鉴定还原糖的实验中，加入斐林试剂时，必须要（ ） A.先加入斐林试剂甲液，后加入乙液 B.将斐林试剂的甲液和乙液等量混匀后再加 C.先加入斐林试剂乙液，后加入甲液 D.以上A、B、C三项操作方法都正确 4.可用于鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂（ ） A．斐林试剂 　 　 B．双缩脲试剂 C．苏丹Ⅲ染液 　 D．苏丹Ⅳ染液 5.下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是（ ） A．淀粉　　B．果糖　C．蔗糖　　D．纤维素 6.下列哪个实验用到显微镜（ ） A．可溶性还原糖的鉴定 B．蛋白质的鉴定 C．脂肪的鉴定 D．淀粉的鉴定 7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是（ ） A．先加A液，混合后再加B液摇匀观察 B．先加B液，混合后再加A液摇匀观察 C．A、B液混合后加入，摇匀后观察 D．A、B液同时加入样液，摇匀后观察 * 葡萄糖、果糖、麦芽糖（半乳糖、乳糖） 1.选材：还原糖含量高、组织颜色较浅或近于白色的植物。 2.斐林试剂现用现配，甲液和乙液等量混合均匀后加入。 注意事项： 由于叶片中叶绿素的颜色较深，西瓜与西红柿的果实颜色为红色，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显。因此，也不宜作实验材料。 本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织或器官，而且组织的颜色较浅，如苹果和梨的果实。经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 1.双缩脲试剂的使用应先加入试剂A再加入试剂B 2.若用蛋清做为实验材料时，必须稀释10倍以上 注意事项： 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 鉴定物质 添加顺序方法 反应条件 反应现象 0.1g/mL的NaOH溶液 0.05g/mL的CuSO4溶液 0.1g/mL的NaOH溶液 0.01g/mL的CuSO4溶液 还原性糖 蛋白质 甲液和乙液等量混合均匀后再加入 先加双缩脲试剂A液1mL，摇匀，再加双缩脲试剂B液4滴 50-65℃水浴加热 不需加热，摇匀即可 砖红色沉淀 紫色 注意事项： 1.选用富含脂肪的种子，种子必须提前浸泡3-4小时。 2.染色后，一定要用体积分数50%的酒精洗去浮色。 鉴定物质 材料 试剂 现象 可溶性还原糖 梨 （避免颜色干扰） 脂肪 花生 蛋白质 豆浆 鸡蛋清 淀粉 马铃薯 课堂小结： 斐琳试剂 （甲液乙液混合使用） 砖红色沉淀（水浴加热） 苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 橘黄色脂肪滴 红色脂肪滴 双缩脲试剂 (先加A液后加B液、 B液不能过量) 紫色 碘液 蓝色 C D B A B C A *