2 植物组织培养实验室的构建与操作技术 - 副本.ppt

药品柜 冰箱 天　平 磁力搅拌器 恒温水浴锅 2、洗涤室（区） 功能：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、材料预处理，同时兼顾试管苗出瓶等。 要求：需安装一个较大的水池，水泥制作，白瓷砖砌内外表面，池底放一张橡胶垫，以减少玻璃器皿的破损。下水道应畅通，以免妨碍工作。 设备：玻璃器皿、塑料器皿、周转箱、洗涤刷、洗瓶机、洗涤剂、晾干台等。 功能：培养基配制、分装、 高压灭菌，无菌水的制备以及其它物品的高压灭菌等。 要求：20 平方米左右，明亮，通风。配置大型工作台1张。 设备：高压灭菌器、电炉、不锈钢锅、培养基分注器、物品橱1-3个，用以放置线绳、封口材料等。此外还应有烘箱、天平、酸度计、盆与桶等。 3、培养基制作与灭菌室（区） 功能：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代以及一切需要进行无菌操作的技术程序。 要求：接种室要求干爽安静，清洁明亮。接种室宜小不宜大，一般10～20平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒，地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料，室内物品越少越好。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动；室外设有缓冲间。 主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）、紫外线灭菌灯、空调等。 4、无菌操作室（接种室） 缓冲间 功能：是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能进入无菌室和培养室。 要求：可建在准备室外（需3-5平方米）或无菌操作室外（面积1平方米为宜），应保持清洁无菌；备有鞋架和衣帽挂钩，并有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的工作服；墙顶用1-2盏紫外灯定时照射，对衣物进行灭菌。 设备：1-2盏紫外灯、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩。 5、培养室（区） 功能：对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养，无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所。 要求：约需10-20平方米左右。基本要求是能够控制光照和温度，并保持相对的无菌环境，因此，培养室应保持清洁和适度干燥；为满足植物培养材料生长对气体的需要，还应安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置；为节省能源和空间，应配置适宜的培养架，并安装日光灯照明。 设备：培养架（控温控光控湿）、温湿度计、摇床、培养箱、光源、除湿机、换气扇、紫外光源等。 6.观察室 设备：生物显微镜，切片机，酶联免疫检测仪，PCR扩增仪等。 功能：观察并研究培养材料的生长分化情况及其形态发生规律；检查培养材料是否脱毒和发生变异。 要求：室内清洁、明亮、安静，设备先进。 7. 驯化棚室 要求：能够控温调湿、控光通风。 面积：据规模来定。 功能：提供组培苗炼苗的环境。 ① ② ③ 二、仪器和设备 １、烘箱 陈列于洗涤室 作用：干燥洗后的器皿 　　　高温干热灭菌 　　　测定培养物的干重　 　　　气浴 ２、冰箱 各种维生素和激素类药品以及培养基母液均需低温保存，某些试验还需植物材料进行低温处理，普通冰箱即可。 陈列于准备室中 3、加热器 用于培养基的配制。研究性实验室一般选用带磁力搅拌功能的加热器，规模化大型实验室用大功率加热和电动搅拌系统。 4、其它 纯水器、分装设备 5、超净工作台 其操作台面是半开放区，具方便、操作舒适优点，通过过滤的空气连续不断吹出，大于0.03um直径的微生物很难在工作台的操作空间停留，保持了较好的无菌环境。由于过滤器吸附微生物，使用一段时间后过滤网易堵塞，因此应定期更换。 陈列于接种室中 类型：垂直式和水平式 作用：无菌操作用 6、酸度计 用于测定培养基及其它溶液的pH，一般要求可测定pH范围1-14之间，精度0.01即可。 陈列于灭菌室中 PHS-802中文台式酸度计 通用型或经济型酸度计 7、显微镜 陈列于观察室中 类型： 倒置显微镜 原生质体观察 普通显微镜 染色体和叶片气孔观察 荧光显微镜 细胞活力观察 解剖显微镜 立体观察 8、天平 植物组织培养实验室需要不同精度的天平。 感量0.001g的天平（分析天平）和感量0.0001g的天平（电子天平）用于称量微量元素和一些较高精确度的实验用品。 感量0.01g和0.1g的天平，用于大量元素母液配制和一些用量较大的药品的称量。 陈列于灭菌室中 9、高压灭菌锅 用于培养基、玻璃器皿以及其它可高温灭菌用品的灭菌，根据规模大小有手提式、立式、卧式等不同规格。 10、干热消毒柜 用于金属工具如镊子、剪刀、解剖刀，以及玻璃器