3.2-3.3体外受精和早期胚胎培养、胚胎工程的的应用及前景.pptVIP

* * * 体外受精和早期胚胎培养 世界首例试管婴儿 中国首例试管婴儿 根据资料回答下列问题： 1.试管婴儿技术包括哪些操作步骤？ （体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植） 2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同？ 相同之处：都通过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。 试管动物技术 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。 精子 卵子 受精卵 早期胚胎 移植 子宫 个体 2.步骤 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 1.概念：采取雌性动物的 和雄性动物的 ，使其在 受精。 一、体外受精 卵母细胞 精子 体外 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 冲卵法： 采用的主要方法是给供体注射 ，使其排出更多的卵子，之后从 中冲取卵子。 促性腺激素 输卵管 a.如何使雌性动物排出更多的卵子？ 超数排卵处理 b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？ 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 （1）卵母细胞的采集和培养 采集法： 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助 、 或 等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 卵巢 超声波探测仪 内窥镜 腹腔镜 c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子？ d.采集的卵子是否马上可以受精？ 采集的卵母细胞，都要在体外经 后，才能与 精子结合完成受精。 人工培养成熟 获能 （1）卵母细胞的采集和培养 （2）精子的采集和获能 2)精子获能的方法: 1)收集精子的方法: 假阴道法、手握法和电刺激等 培养法: 化学诱导法: 如：啮齿动物、家兔和猪等 如：牛、羊等 放入人工配制的获能液中 放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中 （3）受精 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 获能溶液 或专用的受精溶液 中完成受精过程。 二、胚胎的早期培养 目的： 1.发育培养液: 检查受精状况和受精卵发育能力 成分： 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。 （二盐二素二酸） 2.移植：培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存 不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊： 小鼠、家兔： 试管婴儿： 桑椹胚或囊胚阶段 可在更早的阶段移植 8~16个细胞阶段 二、胚胎的早期培养 有性生殖 无性生殖 核移植技术、 胚胎移植 遵循 不遵循 体外受精 胚胎移植 试管动物 克隆动物 发育起点 生殖方式 技术手段 遗传物质 遗传规律 拓展：比较试管动物和克隆动物 来自2个个体 主要来自核供体 受精卵 重组细胞 胚胎移植 采集卵母细胞 体外培养 采集精子 体外获能 体外受精 早期胚胎培养 受体牛 小 结 （时期： ） 1）超数排卵（试剂） 2）活体取卵（仪器） 3）从屠宰的卵巢取卵 方法①②③ （方法，试剂） （试剂） （培养条件、目的阶段） 成熟的卵子 获能的精子 MII中期 方法 一、胚胎移植 1.概念: 将雌性动物体内的早期胚胎(或者通过其他方式得到的胚胎),移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。 2.生理学基础 1)供体和受体有相同的生理状态； 2)早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能； 3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥； 4)胚胎与受体建立正常的联系,但遗传物质没有改变。 一、胚胎移植 供体母牛(良种) 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛(良种) 配种 冲卵(收集胚胎) 质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） 3.胚胎移植的基本程序(以牛为例): 思考: 怎样使供体和受体母牛同期发情? 1.供体是指：提供胚胎的动物个体,必须是良种。 受