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微生物检验1 高压蒸汽灭菌原理 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 倒置培养 因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 为了防止形成的冷凝水滴到培养基上，使菌落蔓延，不容易辨别菌落特征，也不好计数 防止培养基培养过程中水分散失 大肠杆菌测定为什么要用乳糖胆盐发酵管 胆盐能抑制革兰氏阳性菌等杂菌生长.在初发酵，培养基已经加入胆盐抑制革兰氏阳性菌生长，并在EMB培养基上进行分离培养，因此复发酵培养时无需乳糖发酵管，以免大肠菌肠受到抑制。 胆盐对很多杂菌有抑制作用，但是对大肠杆菌不造成影响 大肠杆菌发酵乳糖，产酸产气，是一个很明显的特征。 大肠杆菌发酵乳糖，产酸产气，是一个很明显的特征。 另外，大肠杆菌不一定需要乳糖胆盐发酵管，而乳糖胆盐发酵管一般是用来做大肠菌群的，大肠菌群包含大肠杆菌，但还有其他一些细菌也属于。 金黄色葡萄球菌在paird-parker平板上的菌落特征如何？为什么？ 特征我已清楚，重要的是我想知道为什么。 黑色是因为金黄色葡萄球菌可以还原BP平板中的亚碲酸钾为单质碲，呈黑色。 晕圈则是因为金黄色葡萄球菌含有卵磷脂酶，可以分解BP平板中添加的卵黄液所含有的卵磷脂而呈白色浑浊（该反应被称为乳光反应或卵黄反应）。 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数？为什么？ 答：菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 3、菌落总数检验时为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在（46±1）℃的温度？ 答：因为营养琼脂温度若温度高于（46±1）℃，容易将验样中的菌烫死；若温度低于（46±1）℃，则营养琼脂会凝固，影响培养效果。 5、大肠菌群检验中为什么首先要用乳糖胆盐发酵管？ 答：因为乳糖胆盐发酵管中的成分有溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，如果颜色不变（呈蓝紫色），说明无产酸的大肠菌群；如果颜色变黄色，说明可能出现能分解乳糖产酸的大肠菌群；胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖；看杜氏小管中是否有气体，判断是否为分解乳糖产酸产气的大肠菌群。 沙门氏菌检验有哪5个基本步骤？ 答：食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：（1） 前增菌；（2）选择性增菌；（3） 选择性平板分离沙门氏菌；（4） 生化试验，鉴定到属；（5） 血清学分型鉴定。 8、沙门氏菌在三糖铁培养基上的反应结果如何？解释这些现象？ 答：三糖铁琼脂斜面培养基含有1﹪乳糖及蔗糖与0.1﹪葡萄糖作为发酵基质，且以酚红作为酸碱指示剂，如培养基由橘红转为黄色，表示有糖类发酵。测试时使用接种针先穿刺至底部，而后于斜面作划线接种，经培养18-24小时后，依情况判断糖类之发酵情形。可能为沙门氏菌的反应结果为： （1）斜面碱性（红色-）底部呈黑色产气或不产气（产气时会造成琼脂裂开）：表示仅葡萄糖发酵。因微生物优先分解葡萄糖产酸，使培养基变黄，但因葡萄糖含量低，于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱性反应，同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱，所以斜面表面为红色；三糖铁琼脂培养基中亦含有硫代硫酸钠作为产生硫化氢之基质，且含硫酸亚铁作为检测此无色产物之指示剂，经接种培养后，若微生物有硫化氢产生，会与亚铁离子作用生成不溶性硫化亚铁之沉淀，进而使培养基变黑。 金黄色葡萄球菌在血平板或B－P平板上的菌落特征如何？ 答：金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。 在B-P琼脂平板上菌落呈圆形，表面光滑、凸起、湿润，直径2～3 mm。灰黑色至黑色，有光泽，常有浅色（非白色）的边缘，周围绕以不透明圈 （沉淀），其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感 1、电热烘箱和高压灭菌锅如何操作? 各有哪些使用注意事项? 2、食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数？为什么？ 3、菌落总数检验时为什么营养琼脂培养基在使用前要保持在 （46±1）℃的温度？ 4、试简述革兰氏染色的步骤。 5、大肠菌群检验中为什么首先要用乳糖胆盐发酵管？ 6、简述大肠菌群MPN计数的