实验七 抑制剂与pH对酶活性的影响.docVIP

实验 pH对酶活性的影响 一、目的要求了解pH 对酶活性的影响掌握试验pH对酶活性影响的原理及方法二、原理酶的活力受环境的pH 的影响极为显著。通常只在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶活性表现最高时的pH 值为该酶的最适pH，低于或高于最适pH 时，酶的活性渐次降低。不同酶的最适pH不同．本实验以枯草杆菌α—淀粉酶来说明pH对酶活性的影响。三、试剂与器材试剂：l. 0.5 ％可溶性淀扮溶液，新鲜配制2. α—淀粉酶稀释液3. 0.2 M 磷酸氢二钠溶液：称取Na2HPO4·2H2O 35.51克，溶于水，定容至1 00 ml。 4. 0.1M柠檬酸溶液：称取C6H8O7·H2O 21.01克，溶于水中，定容至l000 ml。 5．碘—碘化钾溶液器材：1. 试管及试管架2．恒温水浴锅3．吸管10ml 2 支, 5ml 8 支，2 ml 2 支 4. 白瓷调色板 l 块 四、操作 1．取 8 支试管，编号，用管按下表比例添加0.2 M磷酸氢二钠溶液和0.1 柠檬酸溶液，制备 pH 为 4 .4～7.2 的缓冲液。 试管号码 0.2 M磷酸氢二钠(ml) 0.1 柠檬酸溶液 (ml) pH 1 4.41 5.59 4.4 2 4.93 5.07 4.8 3 5.36 4.64 5.2 4 5.80 4.20 5.6 5 6.32 3.68 6.0