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第六章 微生物生长繁殖和影响因子
不同微生物对温度的要求不同,同一微生物在生长的不同时期对温度的要求也会不同。 根据细菌最适温度的不同,可把细菌分为:嗜冷菌(5-10℃)、嗜中温菌(25-40℃)、嗜热菌(50-60℃)和嗜超热菌(70-105℃)。大多数菌为嗜中温菌。 温度对微生物的影响 高温对微生物的致死作用,现已广泛用于消毒灭菌。高温灭菌的方法分为干热与湿热两大类。在同一温度下,湿热灭菌法比干热灭菌法的效果好。这是因为蛋白质的含水量与其凝固温度成反比 30 303030 30 5674 ~ 8080 ~ 90145160 ~ 170 50 25 18 6 0 灭菌时间( min ) 蛋白质凝固温度 ( ℃ ) 蛋白质含水量 ( % ) 在高温时,微生物的蛋白质会发生凝固变性,呈不可逆的变性,导致微生物的死亡。 通常,可以利用高温对微生物的影响来达到杀灭微生物的目的。 (一)高温的影响 1 、干热灭菌 灼热灭菌法 干热灭菌法 在火焰上 灼 烧,灭菌彻底,迅速简便。常用于金属性接种工具、污染物品及实验材料等废弃物的处理。 在干燥箱中利用热空气进行灭菌。通常 160 ℃处理 1 ~ 2 小时便可达到灭菌的目的。此法只适用于玻璃器皿、金属用具等耐热物品的灭菌。其优点是可保持物品干燥。 灭菌的效果取决于细菌中最耐热的结构——芽孢。 2 .湿热灭菌 煮沸消毒法 物品在水中煮沸 (100 ℃ )15min 以上,可杀死细菌的所有营养细胞和部分芽孢。 高压蒸汽灭菌法 它适用于各种耐热物品的灭菌,如一般培养基、生理盐水、各种缓冲液、玻璃器皿、金属用具、工作服等。常采用 121 ℃的温度下处理 15 ~ 30min 间歇灭菌法 将待灭菌物品置于阿诺氏灭菌器或蒸锅 ( 蒸笼 ) 及其他灭菌器中,常压下 100 ℃处理 15~30min 。冷却后,置于一定温度 (28 ℃~ 37 ℃ ) 保温过夜,再以同样方法加热处理,如此反复三次。 巴斯德消毒法 用较低的温度 ( 如用 62 ℃ ~63 ℃,处理 30min 、若以 71 ℃则处理 15min) 处理牛奶、酒类等饮料, 实验室所用高压蒸汽灭菌锅 (二)低温的影响 低温下,微生物的代谢活力低,生长缓慢或停止,但不致死。处于低温下的微生物一旦获得适宜的温度,即可恢复活性。 利用这一特性,各种冰箱成为生物实验中保存生物样品或试剂的重要手段。 一般冰箱的温度在4℃~零下18℃,可以用于保存一般的生物样品。而有的样品需要比较低的温度,甚至低达零下70℃,或更低(如使用液氮,可以达到零下196℃) 二、pH 微生物的生命活动、物质代谢与pH有密切关系。不同微生物对pH的要求有不同。微生物对pH的要求也存在最高、最低和最适三个点。常见的四大类微生物中,对pH的最适(范围)要求分别是,细菌:6.5-7.5(4-10);放线菌:7-8(5-10);霉菌:3-6(1.5-10);酵母菌:5-6(1.5-10)。 在废水生物处理中,pH一般在6.5-8.5(6-9)。生物处理的主体是细菌,它要求pH略为偏碱。过高的pH会使原生动物呆滞,菌胶团解体,影响去除效果,而过低的pH,会使霉菌大量繁殖,造成污泥膨胀。 过高或过低的pH对微生物的影响 (1)影响蛋白质的解离,从而影响细胞表面的电荷,影响营养物质的吸收; (2)影响营养物质的离子化,影响其进入细胞; (3)影响酶的活性; (4)降低抗热性。 三、氧化还原电位 氧化环境具有正电位,还原环境具有负电位。各种微生物对氧化还原电位的要求不同,一般好氧微生物要求Eh在+300~+400mV;专性厌氧的微生物要求在-200~-250mV;而兼性微生物,在+100mV以上时进行好氧呼吸,在+100mV以下时进行无氧呼吸。 环境中的氧化还原电位受到氧分压和pH等因子的影响。 四、溶解氧 微生物可分为:好氧微生物、兼性厌氧微生物和厌氧微生物。 1.好氧微生物 O2的作用有两个,一是作为最终电子受体,二是参与甾醇类和不饱和脂肪酸的合成。 微生物只能利用溶解于水中的O2,即溶解氧(DO)。DO与水温、大气压等因素有关,温度越高,氧的溶解度越小。 在好氧生物处理中,DO是个十分重要的因子,要求提供充足的氧,一般曝气池中的DO要求控制在3~4mg/L。 2.兼性微生物 即能在有氧条件下生存,又能在无氧条件下生存。但两者所表现的生理状态是很不同的。 3.厌氧微生物 只有在无氧条件下才能生存。对于专性厌氧微生物,要求绝对无氧的条件,氧的存在会使微生物死亡;另一些厌氧微生物,氧的存在与否对它没有影响,既不利用氧,也不中毒。 五、太阳辐射 辐射包括:可见光(380-760nm)、紫外辐射(280-380nm)、近红外(760-3000nm)、热红外
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