细胞融合与单克隆抗体电子课件.pptVIP

2、诱导方法： 3、过程： 4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 二、单克隆抗体 * * 思考题 1.克隆动物是指？学.科.网 zxxk. 组卷网 2.核移植的一般操作过程？ 2.2.2学.科.网 zxxk. 组卷网 细胞融合与单克隆抗体 1、概念： 一、动物细胞融合 也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 形成的细胞称杂交细胞 物理（离心、振动、电激）、 化学（聚乙二醇）、 生物（灭活的仙台病毒） 灭活的病毒诱导细胞融合的原理是什么？灭活的含义是什么？（52页资料）学.科.网 zxxk. 组卷网 细胞A 细胞B 杂交细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 （不感染细胞） 保留融合活性 （诱导细胞融合） 动物细胞融合成功的标志是什么？ 为何要用灭活的病毒？ 此时细胞的核型特点？学.科.网 zxxk. 组卷网 融合成功的标志 用途 诱导方法 细胞融合的方法 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 核融合 生出新细胞壁 融合成功的标志 主要制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性学.科.网 zxxk. 组卷网 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 5、细胞融合技术应用 细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育及制备单克隆抗体。 单个细胞 无性繁殖 抗体 什么是抗体？抗体用在医学上有何作用？ 传统方法如何得到抗体？ 抗体存在于生物体的什么部位？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 血清、组织液及外分泌液中。 反复向动物体内注射抗原，从血清中分离抗体。 血清 如何产生大量的单克隆抗体？ 这样得到的抗体在产量如何？纯度高吗？特异性如何？ 产量低、纯度低、特异性差。 什么细胞能产生抗体？每一个这样的细胞能产生几种抗体？ 免疫小鼠 培养骨髓瘤细胞 融合 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 融合后可能什么类型的细胞？如何筛选？ 选择培养基上培养 多种杂交细胞 如何筛选出能产生特定抗体的细胞？ 1.单克隆抗体制备过程 专一抗体检验阳性 专一抗体检验阳性 克隆杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体检验阳性细胞 有限稀释法 计数 103/ml 102/ml 10/ml 0.5-2/孔 杂交瘤细胞 培养后取上清液（含抗体）做抗原抗体检测 挑选能产生特定抗体的细胞后继续培养，以获得足够数量的细胞后，怎样才能得到大量的单克隆抗体？ *