苏木素伊红HE染色实验说明.docVIP

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苏木素伊红(HE)染色试剂盒 产品简介: ? 生产的苏木素伊红(HE)染色试剂盒(Hematoxylin and eosin staining kit)综合了多种经典的HE染色方法,例如Harris法、Mayer法等,简化了操作步骤,缩短了操作时间,并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。 ? 苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。 ? 本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。使用的苏木素伊红染色试剂盒,染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。 ? 染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。本试剂盒至少可以染色个样品。 包装清单:苏木素染色液: 00毫升伊红染色液 :00毫升 说明书 :1份保存条件:室温保存,至少一年有效。 注意事项: ? 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇、无水乙醇以及二甲苯。 ? 染色液可以重复使用多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。 样品数量很多时,可以使用碧云天生产的染色架和染色缸,便于操作。 ? 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验 。 ? 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明: 1.样品处理 a) 对于石蜡切片: 二甲苯中脱蜡5-10分钟。 换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟 蒸馏水2分钟。 b) 对于冰冻切片: 蒸馏水2分钟。 c) 对于培养细胞: 用4%多聚甲醛固定10分钟以上。 蒸馏水洗涤2分钟。 换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。 2. 苏木素伊红(HE)染色 对于上述处理好的样品: 苏木素染色液5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 浸自来水中冲洗去多余的染色液,约10分钟。 蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 95%乙醇5秒。 伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步 骤进行脱水、透明和封片处理。 3. 脱水、透明、封片或进行其它染色 a) 脱水、透明、封片: 95%乙醇脱水2分钟。 换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。 二甲苯透明5分钟。 换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟。 用中性树胶或其它封片剂封片。 显微镜下观察,细胞核呈蓝色,而细胞浆呈粉红色或红色。 b) 进行其它染色: 如果进行免疫荧光染色,或进行Hoechst等荧光染料的染色,伊红染色液染色后: 70%乙醇洗涤2次,每次2分钟。 PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。 然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。

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