农杆菌侵染玉米芽尖导入psy基因的研究.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３２（８）：３６４０ 农杆菌侵染玉米芽尖导入ｐｓｙ基因的研究 １，２ ２ ２ ２ ３ ２ 汪婷婷 　季　静 　王　罡 　 关春峰 　张　烈 　金　超 （１天津大学化工学院　天津　３０００７２　２天津大学遗传工程研究所　天津　３０００７２） （３天津科润津丰种业有限责任公司　天津　３００３８４） 摘要　以玉米自交系天塔五母、７９２２的芽尖为受体，用农杆菌介导法将ｐｓｙ基因转入玉米中。以 植株的转化率为指标，研究了真空处理方式，真空处理时间及共培养时间对转化率的影响。结果 表明，当在真空条件下侵染２０ｍｉｎ，共培养３天时转化率最高。用２００ｍｇ／Ｌ的草胺膦溶液筛选，获 得抗性植株经ＰＣＲ检测有１６株表现阳性，其中天塔五母有１２株，７９２２有４株。ＲＴＰＣＲ及高效 液相色谱（ＨＰＬＣ）检测结果表明ｐｓｙ基因已经整合进玉米基因组并能正常转录，转基因玉米中总 类胡萝卜素含量比野生型玉米提高了２５％。 关键