BD在奈瑟脑膜炎双球菌传代培养中比较探讨.docVIP

BD在奈瑟脑膜炎双球菌传代培养中的比较研究 　　摘要：目的 探索A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗生产中奈瑟脑膜炎双球菌传代培养的最适培养基。方法 用BD代替酸水解酪蛋白制备相应的培养基，传代培养4～5 h，以收获菌体量来确定较好培养基配比。结果 BD用于A群C群奈瑟脑膜炎菌培养细菌数高，能稳定提高奈瑟脑膜炎双球菌的产量。结论 BD可作为A群C群奈瑟脑膜炎双球菌培养的最适培养基 关键词：BD；奈瑟脑膜炎双球菌；培养菌数 The Study about BD in the Medium of Neisseria Menigitids FENG Jun-ping， XIE Peng，SUN Yi-mei，CHEN Zuo-jiang YANG Ming， LI Guo-yan （Lanzhou Institute of Biological Products Co.，Ltd ， Center for Gansu Provincial Vaccine Engineering Research，Lanzhou730046，Gansu，China） Abstract：Objective To explore the optimal medium for culture of the meningococas polysaccharide vaccine.Methods The caseinic acid of BD medium was changed， The Neisseria meningitids was cultived for four-five hours. And the bactertrial to determine the best formulation of the medium was harvested .Results The caseinic acid of BD medium have the advantages of good culture. Conclusion The caseinic acid of BD medium is one of good formulation mediums in cultiving Neisseria meningitids .we should exchange the chemical composition of medium with the Bacterium changed. Key words：Caseinic acid of BD；Neisseria menigitids ； Bacterial concentration 流行性脑膜炎是由奈瑟脑膜炎双球菌引起的急性呼吸道传染病。该病传染性强，起病急，病情发展快和病死率高等特点。我国在大规模疫苗接种后，大大降低流脑的发病率[1]。随着流脑在病原方面变化[2]，须接种A+C群流脑多糖疫苗来预防流脑的流行。为了选择培养脑膜炎双球菌最适宜的培养基，本实验采用调整某些培养基成分来观察细菌培养结果 1资料与方法 1.1一般资料 1.1.1培养基 基础培养基：酵母浸出粉（生物级）0.2%；磷酸二氢钾（AR）0.02%；磷酸氢二钠（AR）0.1%；氯化铵（AR）0.125%；甘氨酸（AR）0.01%；L-谷氨酸钠（AR）0.1%；硫酸镁（AR）0.06%；葡萄糖（AR）1% 酸水解酪蛋白：A：法国Solabia 2.2%，批号：5042767识别码Y120150158，有效期：2019年12月31日；B：美国BD：1.32%，批号：4195668，有效期：2019年05月；C：50%盐酸水解酪蛋白液（自制）：1.2AN%，批号有效期：2013年3月23日 实验组：S（1）号培养基：基础培养基+酸水解酪蛋白（法国Solabia）；BD（2）号培养基：基础培养基+酸水解酪蛋白（BD）；Y（3）号培养基：基础培养基+50%盐酸水解酪蛋白液（自制） 1.1.2菌种 试验用脑膜炎球菌的菌号：A群：CMCC 29201 （A4）菌株；C群：CMCC 29205（C11）菌株。来自中国生物制品研究院 1.1.3反应罐 培养基制备罐：型号：MPS30L Applikon 30L Holland 1.2方法 1.2.1培养基制备[3-7] 开启全自动配制罐，按1.1.1项配方制备基础培养基和实验组培养基，在适宜的配制温度，搅拌转速下溶解。澄清过滤分装待用 1.2.2菌种传代培养 将A群和C群菌种开启后，接种于10%羊血琼脂培养基上，35～37℃，CO2环境培养12～20 h，刮取镜检合格菌苔接种于脑膜炎球菌多糖疫苗培养基扩增8