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ES细胞的基因操作201204
ES细胞的基因操作;基于ES细胞的基因操作;病毒介导的转基因技术
慢病毒和反转录病毒介导的RNAi基因抑制技术
Ma Y, Ramezani A, Lewis R et al. High-level sustained transgene expression in human embryonic stem cells using lentiviral vectors. Stem Cells 2003; 21:111–117.
Gropp M, Itsykson P, Singer O et al. Stable genetic modification of human embryonic stem cells by lentiviral vectors. Mol Ther 2003; 7:281–287.
Zaehres H, Lensch MW, Daheron L, Stewart SA, Itskovitz-Eldor J, Daley GQ. High-efficiency RNA interference in human embryonic stem cells. Stem Cells. 2005 Mar; 23(3):299-305.;转基因或RNAi病毒载体构建;基于病毒的可诱导表达系统;诱导定向分化;Merger;构建含特定类型体细胞报告基因的载体;基于ES细胞的同源重组;传统转基因方法在应用中面临的问题;位点特异的转基因技术;基于胚胎干细胞的基因打靶;传统基因敲除技术;载体构建;构建条件基因敲除载体; XLoxP/LoxPCre-ER ;人和小鼠ESC的显??差别极大的妨碍了同源重组技术在hESC中的运用。
直到2003年，研究者才通过优化的电转方法实现了在hESC中的同源重组。
Zwaka TP, Thomson JA. Nat Biotechnol 2003; 21: 319-321
同源重组技术还目前无法常规地用于hESC的功能研究，并且同源重组技术费时费力，还可能出现其它基因的功能代偿现象。;锌指核酶技术（ZFN）;背景介绍;工程锌指结构
;锌指核酶技术 (ZFNs);锌指核酶技术 (ZFNs);锌指核酶技术 (ZFNs);The significance of ZFNs technique－
Gene knockout and Homologous recombination;Delivery of the ZFNs ;Cell Stem Cell, 97-110, 18 June 2009 ;摘 要;Advantage of this research;Lentiviral Reporter construction:;FigS9. ;Pre-experiment;Homologous recombination combined with ZFNs or not in H9 hESC;Thank you!
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