分子与诊断学整理【江大京江版】.docVIP

原核生物基因组 原核生物主要包括、细菌、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、放线菌、蓝绿藻等 ? 有关质粒 按质粒的功能分类： 致育质粒?????? F质粒）编码性菌毛，介导细菌之间的接合传递； 耐药性质粒???? R质粒）?? 编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性； 毒力质粒?????? Vi质粒）编码与该菌致病性有关的毒力因子； 细菌素质粒???????????? 编码细菌产生细菌素； 代谢质粒?????????????? 编码产生相关的代谢酶。 按复制机制分类： 1、严紧控制型 拷贝数少，一般10个，分子量大； ?调节因子是蛋白质，复制受限，受染色体DNA复制系统的控制； ?严谨控制机理（低拷贝原因），认为是该质粒可以产生阻遏蛋白，反馈抑制自身DNA合成。 2、松弛控制型 拷贝数多，10-200个，分子量小； 调节因子是RNA，复制不受染色体DNA复制系统限制 基因工程使用松弛型（高拷贝数） 质粒，以获得较多的基因产物。 性质： 1、转移性：可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个细菌细胞中，使两个细胞都成为带有质粒的细胞；质粒转移时，它可以单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可成为基因工程的载体。 2、质粒具有选择性标记：质粒有抗药性基因、营养缺陷型基因、抗重金属盐基因等多种选择性标记； 3、质粒的不相容性：同一类群的不同质粒一般不能在同一菌株内稳定共存； 4、自主复制性：能独立于宿主染色体DNA外独立复制（但也必须在宿主细胞内才能复制）； 质粒已成为分子克隆的有用工具，是目的DNA的载体。载体质粒大多是在天然质粒基础上经人工构建而成， 质粒的一些特点： 1、有限制性核酸内切酶单一切口，可用以重组外源DNA； 2、有筛选标记，如抗药基因等； 3、插入外源DNA后，仍能转化宿主细胞，并能复制。 质粒基因转移的方式： ?? 1、接合作用?? 当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）的DNA转移称为接合作用 2、转化作用?? 通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，称为转化作用 3、转导作用? 当病毒从被感染的（供体）细胞释放出来、再次感染另一（受体）细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用 4、转染作用?? 通过感染方式将外来 DNA 引入宿主细胞，并导致宿主细胞遗传性状改变的过程称为转染 (transfection) 。转染是转化的一种特殊形式。 ? ? ? 完整的病毒颗粒包括：衣壳 、基因组（DNA或RNA） 、被膜、病毒颗粒中的其他内容物 ? 病毒分段基因组：流感病毒属分段RNA病毒 意义： a）降低包装压力 b）降低了造成断裂的可能性，提高编码能力? c) 有分段基因组的病毒一般感染效率较低，只有全部基因组核酸片段存在时，病毒才具有感染能力。植物病毒 d) 由于分段基因组易发生重组，故病毒容易变异。 ? 病毒基因组特点： 1、5‘的帽子和3’的poly（A）尾结构 2、末端重复序列结果：粘性末段、正/反向互补序列、长末端重复序列； 3、 高效基因组：排列紧密很少间隔区，不仅非编码序列少，而且有重叠基因的存在； 4、分段基因组：易重组，是病毒易变异的原因。 ? ? ? 染色体的包装： （1）染色体的一级结构—核小体 （2）染色体的二级结构—螺线管 （3）染色体的三级结构—超螺线管 （4）染色体的四级结构—染色单体 ? 真核生物染色体基因组一般特征 1、真核生物的基因组比较庞大； 2、线性双链DNA和二倍体； 3、真核细胞基因转录产物为单顺反子。 4、存在重复序列，重复次数可达百万次 以上 5、基因是不连续的（断裂基因） ? 重复序列：指多拷贝的相同或近似序列的DNA片段 一、高度重复序列 ， 按其结构特点分为三种 ： 1、反向重复序列 2、卫星DNA 由于这类序列的碱基组成不同于其他部份，可用等密度梯度离心法将其与主体DNA 分开，因而称为卫星DNA （或随体DNA） 3、较复杂的重复单位组成的重复顺序 二、中度重复顺序 ： 依据重复顺序的长度，中度重复顺序可分为：短散布元件和长散布元件?? Alu 家族：是哺乳动物基因组中含量最丰富的一种中度重复顺序家族（短分散元件），Alu家族每个成员的长度约300bp ，每个单位长度中有一个限制性内切酶AluⅠ的切点（AG↓CT），Alu可将其切成长130和170bp的两段，因而定名为Alu序列（或Alu家族） ? 线粒体DNA的遗传特性 ： 母系遗传、突变率高、异质性、阈值效应、半自助复制与协同效应 阈值效应：mtDNA突变导致氧化磷酸化水平降低，当突变的mtDNA达到一定比例时，使得线粒体总的能量供应降低到维持组织正常功能所