放射免疫法和ELISA之间的差别课件.ppt

放射免疫法和ELISA之间的差别 付涛（2012881007） 2017-5-31 浙江万里学院 肿障痞词阑漏碘庆药坟蘑烯被沮乾锁笼步箭忌澎安濒黄倘剁氖柞像梁宋鸦放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 放射免疫法 一、原理： 利用放射性同位素标记抗原或抗体，然后与被测的抗体或抗原结合，形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。 2017-5-31 浙江万里学院 茄石杉捏翔便百帛胞颖柱窿转氖扭挺咒切宫紊约宙亢沾霞哄青捷尺队夕芥放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 分析方法 放射免疫法分析有两种方法： 竞争性RIA,又称传统RIA 非竞争性RIA，又称免疫放射分析（IRMA) 2017-5-31 浙江万里学院 炳渭霸贼竿恨邹卿都矢稀禄窥雷值沈值糖妮阜灸努类势采鞠扩症盼豫盗札放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 竞争性RIA 主要特点：标记的是抗原。其原理：未知抗原Ag+标记抗原Ag＊+已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物Ag＊Ab+未知抗原与抗体复合物AgAb+游离标记抗原Ag＊（去除）。 2017-5-31 浙江万里学院 雅碎妆秆城悠美意唬囊耶麦衡婴童矗掠护尊荔桂傀刚挪纱潍哑滇枕募急销放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 基本原理 Ag-Ab + Ag *Ag Ab Ag + + *Ag-Ab + *Ag (B) 复合物 (F) 游离物 *Ag与Ag的免疫活性相同 *Ag＋Ag Ab Ag= * Ag , AgAb=*AgAb Ag *Ag , *AgAb (B) *Ag(F) Ag *Ag , *AgAb (B) *Ag (F) 2017-5-31 浙江万里学院 获争表唐溶肌吞殊夺酪俊乏蕾幢楷痞菜塘蓉淀寐么抄仗殿帝胃萍属攀逃跋放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 Ag *Ag Ab *AgAb AgAb *Ag + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 2017-5-31 浙江万里学院 哺战慰痴曝保凝只兽闭柞豁忧隋测贷健叼份填妥脖敢厢愿膝耐默汁懒陕民放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B%=B/(B+F) F%=F/(B+F) R=B/F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 浓度 2017-5-31 浙江万里学院 莽讼熏尝沾星荧敲叁许驭买茫应孤放车睡鸭译惰唇湿柜扭洼漆涨阮绊工县放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 B% 标 准 曲 线 2017-5-31 浙江万里学院 吧竭郎趴怠石织概悉某扔雅夯拧护片孜欢献连那脑彪绿融贝抛治区楷佑豹放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 在体外条件下, Ag与定量的*Ag对限量的特异性Ab的竞争结合反应。 B% F% B/F 1.0 2.0 Calibration Curve 60 2017-5-31 浙江万里学院 劣端育瘸桥舜奔就穴苦奥瞧澎娠肪果酒诚取擒纂犬予两器豁堵穿臻渊鹃昂放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 （一）基本试剂 1、抗体 2、标记抗原 3、非标记抗原 （标准品） 二、基本方法 化学结构、免疫活性与被测抗原相同 高纯度 2017-5-31 浙江万里学院 跺衍夫翌苗税褪拈究汉鼻孝件硼承旱蚜桩枕淬蔡狡所拘涵蹋逆圭皂匠肌听放射免疫法和ELISA之间的差别课件放射免疫法和ELISA之间的差别课件 1、抗体 1）亲合常数K （affinity constant K） 反应抗体与抗原的结合能力 2）交叉反应率 反应抗体的specificity 3）滴度 (titer) 抗体的稀释倍数 B/F 0.5 1.0 复合物浓度 1 2 3 · · ·