抗体制药-课件第三篇.ppt

第三章 抗体制药 第一节 概述 一、抗体的概念 最早应用的预防和治疗传染病的抗体药物为抗毒素血清（1890，Behring）。 1937年Tiselius等人用电泳法将血清蛋白分为白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白（丙种球蛋白），并证明抗体活性主要存在于丙种球蛋白组分。因此，在相当一段时间内，丙种球蛋白成为抗体的同义词。 1、抗体（Antibody，Ab）：指能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体产生的原因：机体免疫系统因病原菌、病毒感染，受抗原物质刺激后产生B淋巴细胞，被活化的B淋巴细胞经增殖、分化产生浆细胞，浆细胞合成和分泌抗体。 2、免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）：具有抗体活性及化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。 所有的抗体均是Ig，但并非所有的Ig都是抗体。Ig是化学结构的概念，抗体是生物学功能的概念。 3、多克隆抗体：针对多种抗原决定簇的抗体。 由于病原菌含有多种抗原决定簇的抗原物质，由此刺激而产生的抗体制剂是多种抗体的混合物（其产量低，难以满足临床需要）。 4、单克隆抗体（Monoclonal Antibody，McAb）：采用B淋巴细胞杂交瘤技术，由纯一的单克隆细胞系产生的，针对一个抗原决定簇的，结构和特异性完全相同的高纯度抗体称单克隆抗体。 特点： a、具有高度的特异性，均一性。 b、来源稳定，可大量生产，为抗体制备和应用提供了全新的手段。 二、临床实践中的作用 1、用于疾病的诊断 a、利用单克隆抗体检测与某些疾病相关的抗原，辅助临床诊断。 b、用放射性标记的单克隆抗体进行肿瘤显像，做免疫定位诊断。 2、McAb制剂用于疾病的治疗 a、针对分化抗原CD3的单克隆抗体对器官移植排斥反应有显著的抑制效果。 b、以McAb作为载体的导向药物可对肿瘤进行定向治疗。 近年来通过对McAb的改造，消除其鼠源性（免疫原性）并降低其分子量，只保留其同抗原特异性结合的活性，再用其制备导向药物用于肿瘤治疗，进而提高了免疫导向疗法的效果，使该领域得以迅速发展，目前成为抗体应用研究的热点。 第二节 单克隆抗体的制备 单克隆抗体是将能产生抗体的B淋巴细胞与具有无限增殖能力的骨髓细胞进行原生质体融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。 一、McAb制备的一般程序 B淋巴细胞 × 骨髓瘤细胞 ↓融合 杂交瘤细胞 ↓有限稀释 ↓克隆化 纯一的单克隆细胞系 ↓ McAb 抗原 矿物油 ↓ ↓ 注射活鼠 注射BalB/c小鼠 刺激产生免疫反应 诱发产生骨髓瘤细胞 ↓ ↓制备 取鼠脾脏→ B淋巴细胞 × 骨髓瘤细胞(HGPR缺陷) ↓ ↓融合（PEG） 制取B淋巴细胞 分装多孔板选择性培（HAT） ↓ ↓亲株死亡 B淋巴细胞培养 杂交瘤细胞生长繁殖 ↓ ↓有限稀释、克隆化 制取多克隆抗体 分离出单克隆细胞系 → McAb 二、McAb制备的基本技术 （一）抗原的制备 制备针对特定抗原的单克隆抗体，首先要制备用于免疫的适当抗原。 1、化学合成法制备高纯度的单一抗原 在已知抗原的化学组成和结构的情况下进行。 2、由病