探讨沉默信号转导及转录激活因子4及细胞因子信号负调控因子3对辅助性T细胞分化的影响.pdf

生堡匡堂丞壶兰Q堕生§旦§旦筮!!鲞筮!!翅盟笪丛型』￡堑塑：丛坚』，!Q塑：!垡：塑：盟生!Z ·1197· ．基础研究． 探讨沉默信号转导与转录激活因子一4 及细胞因子信号负调控因子．3 对辅助性T细胞分化的影响 孙蕾魏晓丽 王青山 郑慧琳向荣王悦 【摘要】 目的探讨沉默信号转导与转录激活因子4(STAT4)及细胞因子信号负调控因子．3 (SOCS3)后对白细胞介素(IL)-12及lL4诱导的辅助性T(n)淋巴细胞分化中的影响以及对于Thl 及Th2细胞亚群分泌细胞因子的影响。方法以IL-12和114分别诱导初始Th细胞(Th0细胞)分 化为Thl或Th2细胞；通过RNA干扰技术分别沉默Th0，Thl和Th2细胞中的STAT4和SOCS3的表 达，然后继续给予相应的IL—12或IL4刺激培养细胞。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和酶联免 疫吸附分析(ELISA)分别检测Thl／Th2特异性细胞因子的mRNA及蛋白质的变化，通过比较沉默前 后Thl／Th2细胞特异性细胞因子量的变化以评价沉默STAT4或SOCS3对于ThO细胞分化方向的影 响以及对Thl／Th2细胞分泌细胞因子的影响。结果沉默STAT4使Th0和Thl细胞的Thl型细胞 因子明显减少，而Th0和Th2细胞的Th2型细胞因子增多；沉默SOCS3后，Th0，Thl和Th2细胞的 Thl及Th2型细胞因子均无明显改变。结论STAT4介导IL-12诱导的Thl分化、维持Thl细胞分泌 细胞因子，并推测其可能具有直接抑制Th2分化的作用；而SOCS3在IL-12及IL4诱导的ThO细胞分 化中不具有关键性作用。 【关键词】辅助性T细胞；细胞分化；转录激活因子；信号负调控因子 of and ExperimentalinvestigationofrolesSTAT4andSOC舒indjmrentiationcytokinesecreti叩of T cells sUN helperb，1RN氏interferenceLei，WEiXiao—li，WANGQing—shan，ZHENGHui—t讯，XfANG of of 300071， 勘增，肌ⅣGYue．DepartmentImmunology，SchoolMedicine，Nankai‰毋，Tianjin China author：WANG Corresponding Yue，Ema／／：wangyue@nanka／．edl厶c，l To therolesof transducerandactivatorof 4 【Abstract】Objectiveinvestigate signal transeriptiOil of differentiationand secretionofT (STAT4)and cytokinesignaling3(SOCS3)in c”ol【ine suppressor nlocellswere to to111l 7rh2 helper(r11I)cellsseparate induceddifferentiateor by silencing．Methods cellsinterleukin interleukin mRNAsofsTAT4andSOCS3weresilenced by 12(IL．12)or4(IL-4)．The 8lllau andr11】2cellsandthenthe cultured RNA(siRNA)inr11lo。仆1 separatelyby interferin