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第二章 基因结构及其对基因操作的影响 一 基因的概念 二 DNA的结构 三 基因结构及其对基因操作的影响 DNA—基因发展简史 1847年Schleiden 和 Schwann提出“细胞学说” 生命的基本单位。 1864-1910年 孟德尔、摩根提出遗传单位，形状与基因相关联。 1936年 Sumner 证实酶是蛋白质。 1944年 提出了DNA是遗传信息的载体。 1953年 Watson和Crick提出DNA双螺旋结构。 1954年Crick提出遗传信息传递规律（中心法则） 1958年Meselson提出DNA半保留复制。 1965年Jacob和Monod提出操纵子（operon）模型，DNA遗传信息从mRNA到蛋白质。 1969年美国科学家Nirenberg破译了DNA遗传密码。 1980年Sanger设计出测定DNA分子内核苷酸序列的方法。 1993年Mullis发明了PCR仪 2000年-2002年测定人类基因组核苷酸序列为30亿bp，基因为3万多个 一 基因的概念 （一）基因：通常也叫“顺贩子”，是遗传的基本单位，它携带着某种RNA分子或蛋白质分子的遗传信息。从本质上，基因是一段具有特殊功能的连续的脱氧核糖核苷酸序列，是构成巨大遗传染色体的组成成份。 一 基因的概念 （二）基因是什么 著名的肺炎球菌实验 1928年，英国 Griffith S型肺炎球菌：有荚膜，菌落表面光滑 R型肺炎球菌：没有荚膜，菌落表面粗糙 一 基因的概念 结果说明：加热杀死的S型肺炎球菌中一定有某种特殊的生物分子或遗传物质，可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌 这种生物分子或遗传物质是什么呢？ 纽约洛克非勒研究所 从加热杀死的S型肺炎球菌将蛋白质、核酸、多糖、脂类分离出来，分别加入到无害的R型肺炎球菌中 结果发现，惟独只有核酸可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌。 结论：DNA是生命的遗传物质 更有说服力的噬菌体实验 195年，Hershey和Chase 病毒（噬菌体） 放射性同位素35S标记病毒的蛋白质外壳，32P标记病毒的DNA内核，感染细菌。 新复制的病毒，检测到了32P标记的DNA，没有检测到35S标记的蛋白质， DNA在病毒和生物体复制或繁殖中的关键作用。 二 DNA的结构 （一）DNA的组成与结构 碱基：腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C） 核糖：脱氧核糖 磷酸 （二） DNA的复制 DNA的半保留复制 DNA合成的同位素示踪实验 1958，Meselson和Stahl 大肠杆菌 15NH4CI为唯一氮源的培养液中生长若干代 被15N标记的大肠杆菌转入14NH4CI为唯一氮源的培养液中 完成第一代和第二代繁殖时，分离DNA，密度梯度超速离心 被15N标记的亲代双链DNA（记作15N/15N）密度大，在下部；14N/14N密度小，在上部；15N/14N在15N/15N和14N/14N之间 证实半保留复制的实验 DNA的半保留复制 DNA的复制发生在细胞周期的S期，在解旋酶的作用下，首先双螺旋的DNA可以同时在许多DNA复制的起始位点局部解螺旋并拆开为两条单链，如此在一条双链上可形成许多“复制泡”，解链的叉口处称为复制叉。 DNA的半保留复制 DNA的复制总是由5‘ 向3’ 方向进行 DNA的半保留复制保证了所有的体细胞都携带相同的遗传信息，并可以将遗传信息稳定地传递给下一代。 半 保 留 复 制 三 基因结构及其对基因操作的影响 启动子是指确保转录精确而有效地起始的DNA序列 终止子位于基因3’端,给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列 DNA转录和RNA翻译，即遗传信息从基因流向RNA又流向蛋白质的过程总称为基因表达 转录的起始是基因表达的关键阶段，是RNA聚合酶与启动子的相互作用。启动子的结构影响它与RNA聚合酶的亲和力，从而影响基因表达水平。 三 基因结构及其对基因操作的影响 （一）原核基因及其产物的共线性 基因决定蛋白质的序列组成，是由密码子对应特定氨基酸所决定的。当一个基因的核苷酸序列与其产物的氨基酸序列是一一对应时，则表明它们是共线性的。在原核生物中，基因与其产物是共线性。 三 基因结构及其对基因操作的影响 （二）真核基因及其产物的非共线性 20世纪70年代以来，在真核生物中发现了间断基因（interrupted gene），后来发现这种间断基因在真核生物中普遍存在，也就是后来所说的基因间存在着内含子（intron）。 内含子指真核生物基因中不能翻译成蛋白质