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．论著．
V617F
荧光PCR结合熔解曲线法检测JAK2
突变方法的建立及其方法学验证
胡婷婷 陈宇明 张心菊 顾小叶 关明 刘维薇
【摘要】 目的参考美国病理学家协会(CAP)相关要求，验证本实验室自建的JAI(2V617F突
变检测项目的各项性能参数。方法方法学建立。收集2010年4月至12月复旦大学附属华山医院
已确诊的57例BCR／ABL融合基因阴性骨髓增殖性肿瘤患者的外周血和骨髓液标本。采用荧光PCR
结合熔解曲线法建立JAK2V617F突变方法检测标本。在准确度、重复性、分析灵敏度、干扰物质的
影响等各方面对检测方法的性能进行评估。准确性使用Kappa检验评估，重复性使用符合率，分析灵
敏度使用配对t检验进行统计分析。结果荧光PCR结合熔解曲线方法(试验方法)与参考方法(测
序法)相比有非常好的一致性(Kappa=0．89)；重复性符合率为100％；血脂(24mmol／L)和黄疸
基于荧光PCR结合熔解温度
(450tzmol／L)对本试验无明显干扰；最低检测突变率为5％。结论
反应方法检测JAK2V617F突变可应用于临床检测。f手华检验医学杂志，2013，36：796-800)
【关键词】Janus激酶2；聚合酶链反应；突变
of V617Fmutation fluorescencePCR
Establishmentand validationJAK2
analytical assayby
combinedwith curve HU Xin
meltinganalysis T／rig—ting8，CHENYu—ming，ZHANGju，GUXiao-ye，
GUAN Clinical
Ming，HUWei—wei．。Departmentof Laboratory，HuashanHospital，FudanUniversity，
2删O．饥ina
Shanghai
author：LIUWei—wei，Email：huashanvivian@126．corn
Corresponding
Objective tothe ofthe ofAmerican
【Abstract】 AccordingrequirementsCollege Pathologists
validatethe test．JAK2V617Fmutation．MethodsThisiSaclinical
(CAP)．to laboratorydeveloped
bloodandbonenlarrow werecollectedfromthe
laboratorydiagnosisstudy．Fifty—sevenperipheral samples
inHuashan from 2010toDec
BCR／ABL—negativemyeloproliferative HospitalApr
neoplasms(MPN)patients
V617FmutationwasdetectedfluorescencePCRcombinedwith curve
2叭0．JAK2 by meltinganalysis．The
anti—interferenceofthe werevalidated．The
accuracy，precision，ana
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