用于氯霉素和克伦特罗兽药残留检测的高通量悬浮芯片技....pdfVIP

用于氯霉素和克伦特罗兽药残留检测的高通量悬浮芯片技....pdf

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用于氯霉素和克伦特罗兽药残留检测的高通量悬浮芯片技...

2009 2 33 1 Bu llAcad M il M ed S c,i Feb 2009; Vol 33 No 1 41 1 1* 1 1 2 2 2 , , , , , , ( 1. 军事医学科学院卫生学环境医学研究所, 天津 300050; 2. 军事医学科学院放射与辐射医学研 究所, 北京 100850) [ ] : 建立 一种检测氯霉素( chloram phen icol, CA P) 和克伦特罗( clenbuterol, CL)兽药残留的新型高通量 悬浮芯片技术: 合 2种兽药的牛血清白蛋白 ( bov ine serum album in, BSA )结合物, 并进行紫外和质谱鉴 定将 2种兽药的 BSA 蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体 聚苯乙烯荧光微球上, 在液相反应体系中, 2 种小分子兽药抗原和微球上的结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗, 优化和筛选出微球上偶联 BSA 结合物和反应抗体的最适加入量绘制 2种兽药残留检测的标准曲线, 进行特异性检测和盲样的测定: 2 种小分子兽药可与 BSA 功偶联, CAP 和 CL 与 BSA 的偶联比分别为40 1和 31 1经过优化, 2种结合物的最适加 入量均为 5 g/ 100 l羧基微球; 最佳抗体加入量分别为 5和 1 ng/2 000 个反应微球检测的标准曲线方程和方程相 0. 980 2 应的决定系数分别为: YCAP = - 250. 323+ 4103. 517 / [ 1+ (X /30121. 243) ], r = 0. 994 和 YCL = - 263012. 682 + 0. 115 2 5 26575 1. 765 / [ 1+ (X /6. 063) ], r = 0. 9892种兽药悬浮芯片的检测区间分别为 40~ 6. 25 ! 10 ng/L 和 50 ~ 5 7. 81! 10 ng /L; 最低检出限为: 40 ng/L 和 50 ng /LCA P 和 CL 最低检出限均低于国标同时, 悬浮芯片的特异度 测试良好, 与其他药物无明显交叉反应悬浮芯片对盲样测定的检测浓度值与实际浓度偏差较小扫描电镜对微 球表面微观结构的观察也直观地确证了蛋白在微球上的 功偶联: 高通量悬浮芯片技术操作简单, 灵敏快 速, 本低廉, 为多种兽药残留的快速检测提供了新方法, 具有广阔的应用和发展前景 [ ] 氯霉素; 克伦特罗; 药物残留; 悬浮芯片; 微球; 中位荧光强度 [ ] R944. 9; S859 [] A [ ] 2009) 01004 105 Detection of chloramphenicoland clenbuterol residues by highthroughput suspension array technology 1 2 * 1 1

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