羟丙基-β-环糊精富集提取射干中异黄酮.pdfVIP

第 29卷 第 6期 应 用 化 学 Vo1．29Iss．6 2012年6月 CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY June2012 羟丙基 -环糊精富集提取射干中异黄酮 李美慧 张 宇 张 森 夏婷婷 郝爱友 (山东大学化学与化工学院 济南250100) 摘 要 利用羟丙基 ．环糊精 (HP -cD)水溶液对中药射干 (Belamcandachinensis)中功能性成分异黄酮类 物质富集提取。考察了时间、温度等对提取效果的影响，确定了优化的工艺条件；结合紫外光谱、高效液相色 谱和液相色谱．质谱联用等检测手段，测定提取源总异黄酮含量及黄酮种类。在此条件下，对异黄酮类物质的 提取总量较纯水浸取提高 1倍 ，鸢尾苷提取量可提高2倍。 关键词 羟丙基 一环糊精 ，射干，异黄酮，鸢尾苷 中图分类号：0625．4；0629．9 文献标识码：A 文章编号：1000-0518(2012)06-0730-03 DOI：10．3724／SP．J．1095．2012．00307 中药射干为鸢尾科植物射干Belamcandachinens~(L．)DC的干燥根茎，始载于 《神农本草经》，为 《中国药典》(2005版一部)收载品种。主治咽喉肿痛、痰咳气喘…。现代药理实验表明，射干具有明显 的抗炎及抗病毒、抗氧化 2J、雌激素样作用，近年来还发现有治疗骨质疏松和癌症的作用 J。射干根茎 的主要药理活性成分为鸢尾苷、鸢尾新苷 B、鸢尾甲苷A、野鸢尾苷、鸢尾苷元和野鸢尾苷元等异黄酮类 化合物。其中鸢尾苷 含量最高(0．81％一2．oo％)，以其在生药中的含量来评价射干的质量 J。 射干中功能性成分的传统提取方法是通过纯水或甲醇、乙醇溶液在常温条件下浸提得 J。该方法 不但提取率低、成分混杂，且需要回收提取剂。羟丙基 一环糊精(HP-fl—CD)在药剂中不但能降低药物的 刺激性、毒性和副作用，还能提高药物的水溶性及生物利用度，近年来，已有利用环糊精包合有机溶剂中 中药功能性成分的报道 J，但未见直接使用环糊精溶液进行中药成分提取的研究。本实验 以水为提取 剂，Hp-fl—CD作为助提取剂，以其对射干中的功能性成分的包合作用，分别提高了射干中功能性成分 (异黄酮类物质)和单一组分 (鸢尾苷)的提取量，提出了适宜的提取工艺。 提取液的异黄酮总含量参照李 国信等 的紫外分光光谱法 (uV)测定。在最大吸收波长处 (266nm)测定鸢尾苷溶液吸光度，以溶剂为参 比，绘制标准 曲线，拟合 回归方程为：Y=0．807X+ 0．0125，r=0．9995。鸢尾苷浓度在 1～9mg／L范围内有 良好线性关系。样 品测定时取定容后溶液稀释 50倍，由于蓝移作用测得最大吸收波长在263nm处，测此处吸光度换算为每 10g射干中异黄酮物质的 含量。 用 HPLC、HPLC—MS峰面积归一法测定提取液中各异黄酮的相对含量。色谱条件：AgilentZorbax SB—C18色谱柱(4．6mm×250mm，5 m)；AlltechC18guardcolumn(7．5mm×4．6mm，5 m)预柱 ；0．4％ 冰醋酸(A)和乙腈(B)为流动相，进行梯度洗脱；流速 1．0mL／min；检测波长 263nm；柱温室温；进样量 2O 。样品测定时取定量提取溶液稀释 10倍，进样测HPLC—MS图谱，确定色谱峰中各化合物。 异黄酮提取量随提取时间的变化 (在25℃下，分别以纯水浸提和HP-fl—CD水溶液提取。每隔0．5h 取提取液，UV法测异黄酮总量)结果如表 1所示。从表 1可见，不论纯水还是 HP-fl—CD水溶液提取，异 黄酮的提取量均随提取时间的延长而迅速升高，但同样条件下 HP-fl—CD水溶液的提取率明显比纯水的 高。3h后，环糊精溶液的异黄酮提取量基本不再升高，而纯水提取量还缓慢升高，故选择提取时间为3h。 提取温度对异黄酮提取效果的影响 (分别以纯水和 HP-fl-CD水溶液为提取剂，在除温度外其它条 件相同、且提取时间为3h时，考虑20～60℃提取温度对提取量的影响)结果列于表 2。从表 2可见，温 度对纯水浸取影响不大，而对 HP-fl—CD水溶液提取有显著影响，且提取量随温