中药鉴定创新方法体系的建立与推广.pptVIP

七叶皂苷注射剂娑罗子药材的基原植物为七叶树Aesculus chinensis、浙江七叶树Aesculus chinensis var. chekiangensis和天师栗Aesculus wilsonii 娑罗子药材DNA条形码鉴定 1. 材料 七叶树属10个物种42份样本采自云南、四川、陕西、湖北、浙江和北京的各个分布区域 结 论 七叶树属候列扩增效率与测序成功率均为100%，并且物种鉴定效率最高，为95.4%，更适用于七叶树属的鉴定分析。 psbA-trnH序列的种间差异最大，在区分物种上具有优势。 基于psbA-trnH序列构建的NJ树，可准确鉴别其各个基原物种。 七叶树属植物psbA-trnH序列 比对变异位点图 正品 柴胡 Chaihu 正品：为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.、狭叶柴胡B. scorzonerifolium Willd.的干燥根。 近缘种：同属植物丽江柴胡B. rockii，小叶黑柴胡B. smithii var. parvifolium ，抱茎柴胡B. longicaule var. amplexicaule，细茎有柄柴胡B. petiolulatum var. tenerum 和窄竹叶柴胡B. marginatum var. stenophyllum。 （三）柴胡与其近缘种的NJ树图所示：柴胡正品基原柴胡与狭叶柴胡均独立聚为一支，与其混伪品可以区别开。 结果表明：基于ITS2序列能很好的区分柴胡及其近缘种 （一）柴胡及其及其近缘物种ITS2序列的二级结构： （二）柴胡与其混伪品ITS2序列间存在较多变异位点 柴胡不同基原ITS2 条形码consensus 序列 柴胡ITS2序列峰图 常用中药材进行了DNA条形码研究 课题组已经进行DNA条形码研究的常用中药材包括：人参，西洋参，三七，大黄，石斛，重楼，金银花，丹参，天南星，红豆蔻，肉苁蓉，京大戟，麻黄，高良姜 ，何首乌，吴茱萸，连翘，甘草，玉竹，冬虫夏草，羌活等 Published papers on DNA barcode Cladistics, 2011, 27: BMC Evol. Biol., 2010, 10:324 PLoS ONE, 2010,5: e13102. China Plant BOL Group. PNAS, 2011,108(49) FEMS Microbiology Letters, 2013 PLoS ONE, 2012, 7(5):e35146. Jingyuan Song, Shilin Chen*. PLoS ONE, 2012,7(8), PLoS ONE, 2010,5: e8613 在google scholar中搜索DNA barcode 共2万条 前3篇 有1篇是中国发表。 DNA Barcoding: a hot research topic 中药材DNA条形码分子鉴定体系受到国内外广泛关注 国家药典委员会、国家科技部、国家濒危物种进出口管理办公室等立项研究 德国、英国、美国同行对中国条形码研究给予高度肯定 中国食品药品检定研究院、中国检验检疫科学研究院、国家公安部物证鉴定中心等不同系统均投入人员与资金 深圳华润三九、武汉爱民制药、牡丹江友搏药业、成都新荷花药业、广东王老吉等20余家企业转让应用 举办四次条形码高级研修班 全国18省72家单位200人参加培训 突破传统分子标记内在鉴定能力瓶颈，绕开核基因组的高复杂度，开发种群水平的、物种特异鉴定标记 平台技术的建立具有典型的示范效应，可推广到所有多基源和多产地用药的中药品种 提出“利用叶绿体基因组进行中药材道性鉴别”的学术假设 中药鉴定学与叶绿体基因组学的有机结合 Nature Comms: Genome Sequence of the Model Medicinal Mushroom G. lucidum《自然》子刊：基因组解析提出灵芝为首个药用模式真菌 USA Today: Chinese “mushroom of immortality” genome mapped 今日美国评述报道 论文被Nature China选为中国最佳研究推介 Acknowledgements * * 中药鉴定创新方法体系的建立与推广DNA barcoding system for herbal materials 陈士林 Shilin Chen 中国中医科学院中药研究所 中药鉴定技术瓶颈 一万余种中药材物种鉴定 品种混乱 传统四大鉴定方法体系的局限 路在何方？ 基原鉴定 形态鉴定