免疫印迹法检测磷酸化蛋白.PDFVIP

免疫印迹法检测磷酸化蛋白 使用生物素标记的Phos-tagTM 进行化学发光法检测 Ver.6 （2012/1 ） 1. 背景 磷酸化是翻译后修饰的一种重要形式，与目标蛋白的功能调解、定位和特异性结合有关。检测磷酸化蛋白方法 （比如磷酸蛋白质组学）在评估生物多样性和生理状态方面是非常重要的。2002年，Koike教授的团队 （日本广岛 大学）发现了一种双环的金属复合体（1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl)amino]propan-2-olato dizinc(II) ），该 复合体可作为磷酸结合标签分子（pH值为中性的Phos-tagTM液体（比如Kd= 25 nM的苯基磷酸二阶阴离子 ， Ph-OPO32- ））。之后，Koike教授的团队研发了可用于磷酸化蛋白质组学研究Phos-tagTM系列产品。这份操作手 册是介绍在PVDF膜上进行电泳印迹时使用Phos-tagTM锌（II ）复合物进行化学发光，检测所有磷酸化蛋白的方法。 2. Phos-tagTM BTL-104,BTL-105和BTL