一实验目的与要求掌握石蜡切片制作的基本过程及其注意.pptVIP

石蜡制片的基本步骤 1.取材 2.杀死与固定 3.脱水 4.透明 5.浸蜡与包埋 6.切片 7.粘片与烤片 8.脱蜡与复水 9.染色 10.切片脱水、透明和封固 1.取材 1.1 材料来源及部位。 ①种类 ②部位 ③发育阶段 ④是观察横切面还是纵切面？ 1.2 取材原则： 动作：快，轻，用力均匀 体积合适 刀要锋利 2. 杀死与固定 目的---杀死各种酶，保持细胞的结构 固定液 固定时间 固定后的处理 最常用的固定液为FAA。固定时间不受限制，短则 数小时，长可延至数月或数年。 配方： 50％或70％酒精 90毫升 冰醋酸 5毫升 福尔马林 5毫升 柔软材料用50％酒精，坚硬材料用70％酒精配制。 卡诺氏(Carnoy’s)固定液：有极强的渗透力 固定根尖和花药只需40-60分钟，时间太长不好(不能超一天)。 固定后用95％酒精冲洗，在组织不能立即处理时，需转入70％酒精中保存。配法有两种： 固定组织时应注意： ①保持组织新鲜，勿使其干燥，尽快固定处理。 ②组织块不易过大过厚，厚度必须控制在0.3cm以内。 ③固定液必须有足够的量，一般大于组织20倍以上。 ④抽气：使固定液尽快渗入材料内部，并排除材料内