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42 第38卷，第 2期 安 徽 化 工 Vo1．38．No．2 2012年 4月 ANHUICHEMICAL INDUSTRY ADr．2012 红曲霉提取姜黄素影响因子的设定研究 潘 婕 ，高振坤 。 (1．中北大学化工与环境学院，山西 太原 030051；2．临沂大学生命科学学院，山东 临沂 276005) 摘要：姜黄素是从姜黄根茎中提取的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗凝 、降脂等多种功效。利用红曲霉发酵从姜黄粉末中提取姜黄 素，通过对发酵过程中不同料液 比、营养比、发酵时间、pH的研究，确定最佳工艺条件为 ：料液比为O．1：50，营养比为 1，4，发酵时间为 4d，pH为5．5，培养温度为30~C，转速为70r／min，装液量为50mU150mL，在此条件下产品得率为 1．785％。 关键词：红曲霉；姜黄素；发酵；影响因子 doi：10．3969／j．issn．1008-553X．2012．02．014 中图分类号：TQ925．7 文献标识码 ：A 文章编号：1008—553X(2012)02—0042—03 姜黄l_【2_是姜科姜黄属一种多年生的草本植物。姜黄 1．2．1姜黄素吸收最大波长的确定 的主要有效成分为姜黄素与姜黄挥发油，前者 占3％～ 取适量姜黄素标准品于丙二醇中溶解，以无水丙二 5％，后者 占4％～8％。姜黄的黄色物质姜黄素为略带 醇为空 白对照，在 20℃下于400～450nm范围内进行扫 酸性的酚性物质，是姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧 描，可得姜黄素在 430nm波长处具有最大吸光度 ，故选 基姜黄素的混合体，称之为姜黄素。姜黄素是从姜黄中 择 430nm作为测定波长 。 提取的天然色素，具有抗氧化、抗炎、抗凝、降脂、抗动脉 1．2．2姜黄素标准曲线的制作 粥样硬化、抗衰老 (消除 自由基)及抑制肿瘤生长等功 称取姜黄素标准品5mg，丙二醇溶解，定量转入 效。传统提取姜黄素的方法有多种 ]，如碱水提取法、有 50mL容量瓶 ，加无水丙二醇稀释至刻度 ，得 0． 机溶剂提取法、酶提取法、表面活性剂协同提取法等；现 100mg／mL贮备液，分别移取0．25、0．5、0．75、lmL上述贮 代提取方法有微波提取法、超声提取法等，但利用微生 备液于25mL容量瓶中，加无水丙二醇稀释至刻度，以 物方法制备姜黄素的研究尚属空白。微生物法提取姜黄 无水丙二醇为空白，在430nm处测定吸光度。 素，旨在微生物发酵过程中，通过调控微生物代谢条件， 1．2．3发酵液全营养配比 使其利用姜黄中的糖、脂、氨基酸等营养物质，从而获得 发酵培养基 (V／V)：大米粉 9％，NaNO 0．2％， 目的产物——姜黄素。采用此种方法更易于生产安全、 KH2PO40．1％，MgSO40．2％，无菌水，0．1MPa灭菌 15min。 纯度高的姜黄素产品。本文希望通过红曲霉的代谢发 1．2．4姜黄素的浸提与鉴定 酵，探索制备姜黄素的新方法。 发酵液先经4000r／min的转速离心处理 15min，去 1实验部分 上清；再用 1，2一丙二醇对处理后的发酵物进行浸提。分 1．1原料、试剂与仪器 离出浸提物，经浓缩后，对获得的产物采用红外光谱法 、 姜黄，购 自山西仁和大药房；姜黄素标准品，购 自贵 紫外光谱法、薄层色谱法进行鉴定。 州迪大科技有限责任公司；红曲霉 ，本院实验室提供；硝 2结果与讨论 酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、1，2一丙二醇、氯仿、甲醇、甲 2．1标准曲线的制作 酸等均为分析纯；蒸馏水、无菌水，本实验室 自制。 根据姜黄素浓度与吸光度的关系制作标准曲线，见 手提式压力蒸汽消毒器、THZ—C恒温振荡器