软骨藻酸分子印迹聚合物的制备及其固相萃取应用.pdfVIP

第27卷第2期 应 用 化 学 Vo1．27No．2 2010年 2月 CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY Feb．2010 ；＼ l5研究论文I5 (曼 ；、 软骨藻酸分子印迹聚合物的制备及其固相萃取应用 李丽丽。 周文辉 李 永 林黎明 朱校斌。 杨黄浩” 王小如 。 (中国科学院海洋研究所 青岛；中国海洋大学化学化工学院 青岛； 国家海洋局第一海洋研究所 青岛266061；山东出入境检验检疫局技术中心 青岛) 摘 要 以贝毒一软骨藻酸的结构类似物 1，3，5-戊烷三羧酸为模板分子，4．乙烯基吡啶为功能单体，乙二醇二 甲基双丙烯酸酯为交联剂，合成了对软骨藻酸具有较好选择性的分子印迹聚合物。经索氏提取去除模板分子 后 ，在聚合物内部形成了与模板分子 1，3，5-戊烷三羧酸以及结构类似物软骨藻酸尺寸、形状以及活性基团互 补的结合位点。通过静态平衡结合实验研究了该聚合物的结合能力和选择性能，与化学组成相同的相应非印 迹聚合物相比，1，3，5-戊烷三羧酸的分子印迹聚合物对软骨藻酸具有较高的吸附性能和选择性。用 150mg印 迹聚合物填充于 1．0mL玻璃注射器制成的分子印迹固相萃取柱，采用离线模式，并结合高效液相色谱实现紫 贻贝和海水中软骨藻酸的分离与检测。对于加标 2mg／L的紫贻贝和海水样 品，回收率分别达到 (93．4± 4．9)％和 (89．7±3．2)％(n=3)。 关键词 软骨藻酸，分子印迹聚合物 ，记忆缺失性贝毒，固相萃取 中图分类号：0658 文献标识码 ：A 文章编号：1000-0518(2010)02-0132-05 DOI：10．3724／SP．J．1095．2010．90114 记忆缺失性贝毒(AmnesiaShellfishPoisoning，ASP)一软骨藻酸(DomoicAcid，DA)…是谷氨酸的一 种异构体，能够与控制细胞膜Na通道的神经递质谷氨酸受体紧密结合，提高ca 的渗透性，使神经细 胞长时间处于去极化的兴奋状态，最终导致细胞死亡，并可能对 中枢神经系统海马区和丘脑区造成损 伤，从而导致记忆力丧失 。目前，测定海产品中软骨藻酸的方法主要有小 白鼠生物学试验法 、毛细 管电泳法_4]、高效液相色谱法 (HPLC) 等，其中HPLC在软骨藻酸的管理与研究中的应用最为广 泛 J，但是因为实际样品基质较为复杂，一般需辅助质谱进行分析，导致分析成本大幅上升。 固相萃取 (Solidphaseextraction，SPE)由于具有回收率高、有机溶剂用量少、能处理小体积试样、操 作简单等优点 而成为最常用的样品前处理方法之一 J，然而传统固相萃取存在着选择性差的严重不 足。分子印迹是制备对特定分子具有专一性结合能力的技术，分子印迹聚合物 (MolecularlyImprinted Polymers，MIPs)具有很好的选择性，高度的稳定性和长的使用寿命，已在分离提纯和传感器等方面显示 出广阔的应用前景 ’m]。Sellergren等 ¨¨首次报道了以MIPs作为固相萃取材料的固相萃取，选择性较 高且几乎不存在杂质干扰，显示了分子印迹固相萃取的优越性。 Lotierzo等 ¨副首次报道了采用光接枝 (photo．grafting)，在表面等离子体共振 (surfaceplasmon resonance，SPR)芯片的金电极上合成了软骨藻酸的分子印迹传感膜，并实现了软骨藻酸的SPR检测，但 制备成本和毒性限制了此方法的推广与应用。Kubo等_】以邻苯二甲酸及其异构体为模板分子采用两 步溶胀聚合法(two—stepswellingpolymerization)，实现了软骨藻酸分子印迹聚合物的无毒、低成本制备， 但是印迹聚合物的制备过程依然较为繁琐。本文采用本体聚合法，以软骨藻酸的结构类似物 1，3，5一戊 烷三羧酸为模板分子模拟软骨藻酸分子合成了对软骨藻酸具有特异性识别能力的分子印迹聚合物，制 备过程简单无毒，适于推广与应用。并尝试将该印迹聚合物用作固相萃取剂，结合高效液相色谱法用于 贝类和海水样品中软骨藻酸的分离、富集与检测。 2009~2-19收稿，2oo9 5_21修回 国家 自然科学基金(20