小鼠VEGF ELISA kit说明书.pdfVIP

Mouse VEGF ELISA KIT 目录号 规格 CMK0019 96 Tests CMK0019 48 Tests _________________________________________________________________ (本试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中天然和重组VEGF 浓度，供科 研使用。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分, 若有任何疑问请与北京嘉美纽诺生物科技有限公 司联系，您将得到我们的技术支持。 简介： VEGF 是刺激血管内皮细胞增殖和移行的重要因子，并可影响血管的通透性，因此也称为血管通 透因子(VPF)。VEGF(VPF)是一个 有高度保守性，由两个相同亚基(Mr 23000)以二硫键交联结合 成的二聚体糖蛋白。VEGF 有四种不同变异体，在人类细胞中其氨基酸残基数为 121，165，189 及 206。 这四种变异是由于 mRNA 剪接差异所至，其中 121，165 个氨基酸残基者易至靶细胞，而余 者多在细胞外基质中。 其基因定位于第六对染色体长臂，包括交替剪接的8 个外显子和 7 个内含 子，这几型 VEGF 生物活性相近，但单体无生物活性。VEGF 189 及 VEGF 206 与肝素结合力强而 VEGF 121 于肝素结合力弱，VEGF 165 则介乎其间，这也是为什么VEGF 189 及VEGF 206 主要分布 于细胞外基质中的缘故。研究证实血管内皮细胞生长因子 （VEGF ）与血管生成关系密切，在临床 上与肿瘤 人的进展及复发有关。 检测原理: 实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠VEGF单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的VEGF会与 单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化 的抗小鼠VEGF抗体和辣根过氧化物酶标记的 亲合素。生物素与亲合素特异性结合；抗小鼠 VEGF抗体与结合在单抗上的小鼠VEGF结合而 形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显 色剂，若反应孔中有VEGF ，辣根过氧化物酶 会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在 450nm处测OD值，VEGF浓度与OD450值之间呈 正比，可通过绘制标准曲线求出标本中VEGF 浓度。 标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血，高血脂标本。 4. 标 应清澈透明，悬浮物应离心去除。 5. 标 收集后若不及时检测，请按一次用量分装，冻存于－20 ℃，避免反复冻融。 6. 可根据实际情况，将标 做适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数) 。 注：正常小鼠血清或血浆样本建议做1：2稀释。 试剂盒组成: 1a 标准品 2/1支(冻 )* 4 ℃ 1b 标准品和标 稀释液 1瓶 4 ℃ 2a 浓缩生物素化抗体 2/1支* 4 ℃ 2b 生物素化抗体稀释液 1瓶 4 ℃ 3a 浓缩酶结合物 2/1支* 4 ℃(避光) 3b 酶结合物稀释液 1瓶 4 ℃ 4 浓缩洗涤液 20 × 1瓶 4 ℃ 显色剂 1瓶 4 ℃(避光) 终止液 1瓶 4 ℃ 抗体包被板条 8 ×12 或 8 ×6* 4 ℃ 封板胶纸 3/2 张* 说明书 1份 *:[96/48 Tests] 所需物品