激光电泳测量条件及影响因素.pdfVIP

维普资讯 · 182· 中国肿瘤 临床 1996第23卷第4期 3 一≥3b 激光电泳测量条件及影Ⅱ向因素 18--／ 胡兰靛 毛慧生 刘珏毛隐 李安之@ 马 登① 刘 键① 天津市肿瘤研究所 (天津市 300060) ～ ～ ——— —— ， ，． ．．．． ．．．． ．．． ．．．． _ l_ f^ ． 摘要 研 究激 光 电泳测量条件及影响 因素发现 ：在实体瘤制每单细胞过程 中，脏原酶消化获 得的单细胞其 电泳迁移聿 高于机械 消化法 ，但在正常组织 中媵原酶 消化与机械消化法所得细胞时 电坪迁移率并无差异 。因此 ，；化酶 的使用影响细胞表面电荷 的测定 。在细胞预处理过程 中，醛化 与束醛化细胞其 电泳迁移率一致 ，醛化不影响细胞表面 电荷的测定 琏变细胞浓度 ，其 电泳迁移卓 随最度 的升高而下降，红细胞浓度2×lO／ml，其 电泳迁移率存在一饱 和值 ，肝 音抗凝影响 虹细 胞 的电艰迁移率 。因此 ，对激光 电泳生精定标选择不加肝素抗凝 的人全血 ，细胞浓度为 3×lO／mI。 在 24c、37C测量细胞 电泳迁移率无改变 ，故激光 电泳在此温度范围内其 电泳迁移率具有温度稳 定 性 。 关键词 堂垄生生 竺堕堕 单细胞制每 生物定标 细胞浓度 TheInfluencingFactorsin M easuringElectro— phoreticM obilitybyLaserDopplerSpectroscopy Hu I．an——Dian M aoHui—Sheng LiuHong——Yin TianjingCancerInstitute．Tianjin Abstract Thisstudy endeavoredto identify thefactorsthatinfluencethe measurementofelectrophoreticmobility(EPM )ofsingledcellsusingLaserDoppler Spectroscopy．Thecellsofsolidturmorspreparedwithcollagenasedigestionhada higherEPM than thosetumorcellspreparedmechanically No such disparitywas observed innormaltissuecells．Thisindicatedthatin theprocessofpreparation of singledcellstheuseofdigestiveenzymeaffectedcellsurfaceelectriccharge．Fixa— tion ofcellwith 0．025 plata dialdehydedidnotalterEPM ，hencenoeffecton cellsurfacechargesAlterationofconcertration ofsingledcellswasanotherfactor thaiaffectedtheEM P．which declinedwiththejncreaseofcellularconcentration．In measuringEPM ofred bloodcells，theaddition ofanticoagulant，heparin affecte